一、阿尔茨海默病的保护因素——运动和户外活动（论文文献综述）
陈生弟,方嵘[1]（2021）在《应重视早期阿尔茨海默病的非药物治疗》文中研究表明阿尔茨海默病是以记忆损害为早期表现和特征的缓慢进展的神经退行性疾病,为最常见的痴呆类型。发病率逐年升高,发病机制复杂,药物治疗效果欠佳,而运动锻炼、认知训练、生活方式干预、心理治疗和音乐疗法等非药物治疗可以通过多种途径减缓阿尔茨海默病的发生发展。因此,应重视早期阿尔茨海默病的非药物治疗,联合药物治疗和多种非药物治疗方法进行多靶点干预,以期最大化改善患者临床症状。
徐勇,林璐,谭琪,李静,凌睿哲[2]（2021）在《阿尔茨海默病的预防理论与干预策略（NEWSTART）》文中研究说明阿尔茨海默病是一种病因复杂的疾病,我们从生物心理社会医学模式出发,针对阿尔茨海默病的早期预防,在国内外文献循证、干预研究实践、多个案例分析经验总结的基础上,提出了老年大脑认知功能维持的双营养理论、阿尔茨海默病病因的社会信息相对剥夺假说以及阿尔茨海默病早期预防的多靶点干预理论,初步制定了阿尔茨海默病早期预防的干预策略（NEWSTART）,包括营养、运动、体重、阳光、训练、交往、休息、信念,希望为阿尔茨海默病的早期预防提供更多的中国路径。
胡京京[3]（2021）在《“五感疗法”在阿尔兹海默症老年人小组活动中的运用研究 ——以S市LW社区为例》文中研究说明
弓烨弘[4]（2021）在《色氨酸及代谢物抑制β-淀粉样蛋白聚集的分子动力学研究 ——对运动延缓阿尔茨海默病的机理初探》文中认为研究目的:阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease,AD）,是众多神经退行性疾病中影响人数最多的一种,脑内β-淀粉样蛋白（β-Amyloid,Aβ）聚集引发的神经毒性被证实是导致AD的关键因素。虽然研究者们长期致力于Aβ聚集及其抑制的研究,但至今仍未开发出有效的治疗药物,目前迫切需要寻找无毒副作用且不受限于血脑屏障的治疗手段和方法。运动能够促进脂肪动员,诱导人体必需氨基酸色氨酸（Tryptophan,Trp）高效跨过血脑屏障,在增强脑内色氨酸水平的同时也增强了其代谢物——人体的重要神经递质血清素（Serotonin,Ser）及激素褪黑素（Melatonin,Mel）的合成。实验研究发现,色氨酸能够对Aβ的聚集过程产生抑制,破坏成熟的Aβ纤维,降低Aβ纤维的神经毒性,并且血清素和褪黑素同样也被证明能够抑制Aβ的纤维化过程,但目前这些分子发挥抑制作用的具体机理仍不清晰。本研究采用分子动力学模拟、副本交换分子动力学模拟等方法探究色氨酸及其代谢物（血清素和褪黑素）抑制/破坏Aβ低聚体和Aβ原纤维的分子机理,能够对运动影响Aβ纤维化过程提供解释的视角,为阐明运动影响AD病理进程提供一定的理论支持,并为运动干预等药物替代疗法和药物设计提供结构基础和理论借鉴。研究方法:为研究色氨酸及代谢物（血清素和褪黑素）影响Aβ聚集过程的微观机理,本研究采用全原子副本交换分子动力学模拟,研究了色氨酸、血清素和褪黑素对Aβ低聚体聚集的抑制机理,并采用全原子常规分子动力学模拟研究了这些小分子解离Aβ原纤维的机理。本研究中的所有全原子分子动力学模拟均使用GROMACS软件进行,使用GAFF力场处理色氨酸、血清素和褪黑素的相关参数,正式的分子动力学模拟采用AMBER99SB-ILDN力场。此外,本研究所涉及的数据处理与分析同样使用GROMACS进行,与此同时,使用自编脚本与程序和一些第三方程序作为数据分析的补充工具。研究结果:阐明色氨酸及代谢物影响Aβ聚集过程的分子机理,有助于为运动延缓AD病理进程提供解释。本研究综合使用分子动力学和副本交换分子动力学模拟方法,对现有实验难以表征的色氨酸及代谢物抑制Aβ聚集的细节机理进行探究。研究的主要结果如下:（1）色氨酸（Trp）有效抑制了二级结构中β-sheet结构的生成,尤其是在N-端区域2AEF4、中心疏水区域17LVF19和C-端区域34LMVGGVV40,同时Trp也促进了对应区域coil和helix结构的生成。Trp削弱了Aβ42二聚体中氨基酸对之间的相互作用,对链间相互作用的削弱更显着,从溶液可及性表面积、链间接触面积、链间接触数量和链间结合自由能的计算也得到了证实。本研究识别出Aβ42二聚体中Trp的主要结合位点,包括F4、Y10、F19、F20、I31、I32和34LMVGGV39。针对Trp与Aβ42原纤维相互作用的研究结果显示,Trp的加入显着降低了Aβ42原纤维N-端的结构稳定性,并破坏了Aβ42原纤维N-端的β-sheet结构,RMSF计算结果则显示Trp增强了N-端区域的蛋白柔性。Trp能够破坏肽链间的稳定性,减少主链氢键,破坏局部疏水核心HC1的疏水相互作用,并削弱K28和A42形成链内和链间盐桥的稳定性。Trp与Aβ42原纤维的主要结合位点包括F4、H6、Y10、H13、H14和L34。（2）血清素（Ser）能够影响Aβ42二聚体的二级结构,在26SNKGAII32区域抑制beta结构的生成。通过分析氨基酸-氨基酸相互作用、溶液可及性表面积、链间接触面积、接触数量和结合自由能的结果可知,Ser的加入明显影响了Aβ42二聚体整体和局部的链间相互作用。本研究识别出Ser与Aβ42二聚体结合于4FRH6、Y10、13HHQKLVFF20、K28、I31、I32和34LMV36。在Ser与Aβ42原纤维相互作用的分析中发现Ser能够削弱Aβ42原纤维的结构稳定性,并且对N-端和C-端区域产生的影响更为明显。此外,Ser的加入还在很大程度上破坏了K28-A42之间的链内和链间盐桥。从综合接触数量、氢键数量和π-π堆积形式的计算结果可知,Ser能够减弱HC1中的疏水相互作用,破坏N-端的β-sheet结构,削弱了原纤维的结构稳定性。（3）Aβ42原纤维的Cα-RMSD结果显示,血清素（Ser）对Cα-RMSD的提高强于质子化血清素（Protonated serotonin,Serpro）。而回旋半径的计算结果则显示质子化后的Serpro能在一定程度上增大原纤维的回旋半径。针对Ser/Serpro影响链间接触数量和结合能的研究结果显示,Ser和Serpro均能减少接触数量并削弱链间结合能,且Serpro的效果相对较强。有关氨基酸相互作用的分析结果显示,尽管Ser/Serpro均能通过破坏HC1中氨基酸间的疏水相互作用和K28-A42盐桥相互作用,但Ser的破坏效果强于Serpro。本研究识别出芳香相互作用主要驱动了Ser与结合位点F4、H6、Y10、H13、Q15和L34之间的结合,而芳香相互作用、疏水相互作用和静电相互作用共同驱动了Serpro与结合位点D1、F4、R5、H6、D7、Y10、H13、Q15、F20、E22、D23和L34的结合。但尽管Serpro的结合位点更加广泛并与更多芳香氨基酸形成了π-π堆积,但Ser与结合位点之间的结合强度更强且与原纤维N-端形成的π-π堆积形式更加丰富,这使Ser能够在更大程度上破坏Aβ42原纤维的稳定结构,解聚已形成的Aβ42纤维。（4）褪黑素（Mel）在Aβ42二聚体上的结合位点几乎遍布整个序列。Mel削弱了N-端区域和中心疏水区域形成beta结构的几率,抑制Aβ42低聚体进一步纤维化。Mel能够减少Aβ42二聚体中链间氨基酸对和链内氨基酸对的相互接触,尤其对链间相互作用的影响更加显着。针对二聚体溶液可及性表面积、两条肽链间的接触面积和数量以及结合自由能的计算结果也显示,Mel能够削弱相邻肽链的链间相互作用。针对Mel和Aβ42原纤维相互作用的研究结果显示,Mel能够提高Aβ42原纤维的Cα-RMSD,降低原纤维的β-sheet结构含量,削弱Aβ42原纤维的链间稳定性。并同时减少疏水核心中的氨基酸相互接触,破坏K28和A42之间的链间和链内盐桥。此外,本研究还识别出Mel能够广泛结合于Aβ42原纤维的外表面和内表面。（5）色氨酸（Trp）与色氨酸混合血清素（Trp＿Ser）均提高了Aβ42原纤维的Cα-RMSD,但尽管Trp＿Ser在N-端和C-端共同提高了Aβ42原纤维结构的Cα-RMSD,但Trp仍能通过仅对N-端结构Cα-RMSD的影响,在更大程度上破坏Aβ42原纤维的整体稳定性。RMSF、主链氢键和Rg的结果同样显示,Trp在更大程度上使整体蛋白构型由紧凑转为松散。同时,Trp＿Ser对链间相互作用的削弱则强于Trp。对二级结构的分析显示Trp和Trp＿Ser都能够明显降低原纤维N-端形成β-sheet的几率。疏水核心稳定性的分析结果表明,Trp和Trp＿Ser分别更加明显地破坏了原纤维N-端和C-端的稳定结构并且Trp＿Ser在更大程度上破坏了K28-A42盐桥。本研究还识别出Aβ42＿protofibril+Trp和Aβ42＿protofibril+Trp＿Ser体系中,Trp和Trp＿Ser的结合位点十分相似,几乎都位于原纤维的N-端。研究结论:（1）Trp能够抑制Aβ42二聚体β-sheet等有序结构的生成,从而使蛋白构象在Trp的抑制效果下,保持更加无序的二级结构。Trp通过削弱二聚体链间相互作用,破坏Aβ42纤维化的结构基础,以此抑制Aβ42异常纤维化的过程。Trp与Aβ42二聚体N-端的结合主要通过π-π堆积作用和氢键作用,而与C-端的结合则主要通过疏水相互作用。同时,Trp的加入显着降低了Aβ42原纤维的结构稳定性,且最显着的影响发生在Aβ42的N-端区域,Trp与N-端形成了较多的氢键和丰富的π-π堆积,说明Trp可在Aβ42的N-端对Aβ42原纤维产生破坏,进而解聚已形成的纤维并抑制纤维进一步聚集。（2）Ser在26SNKGAII32区域有效抑制了Aβ42二聚体的二级结构中beta结构的生成。并且,Ser在很大程度上削弱了由链间相互作用形成的稳定结构,进而阻止形成稳定的聚集体。静电相互作用、疏水相互作用及苯环相互作用共同驱动,且与N-端带电氨基酸形成的氢键是使Ser更多与N-端结合的主要动力。此外,Ser能够削弱Aβ42原纤维N-端和C-端区域的结构稳定性,破坏N-端的β-sheet结构。研究发现Ser可以依靠氢键和π-π堆积与Aβ42原纤维的N-端结合,使N-端成为解聚已形成的Aβ42纤维的关键区域。（3）Ser能够削弱Aβ42原纤维的稳定性,促进解聚已形成的稳定纤维,而质子化后的Serpro尽管能在一定程度上使蛋白结构变得松散,但对蛋白整体结构的影响不及Ser。Serpro对原纤维的链间稳定性的削弱效果相对强于Ser,表明Serpro主要通过削弱链间稳定性对已形成的Aβ42纤维进行解聚。而Ser在削弱链间作用的基础上,还能通过降低N-端的β-sheet形成几率,破坏Aβ42原纤维N-端的β-sheet结构,进而解聚Aβ42原纤维。此外,Ser与结合位点的结合主要依靠芳香相互作用,而Serpro与结合位点的结合主要依靠芳香相互作用、疏水相互作用和静电相互作用共同驱动,这促使相比于Serpro,Ser能够在更大程度解聚已形成的Aβ42纤维。（4）Mel通过削弱N-端区域和中心疏水区域的beta结构形成几率,并削弱肽链间的相互作用,达到对Aβ42低聚体进一步纤维化的抑制。Mel能够通过π-π堆积与疏水相互作用和Aβ42二聚体的几乎整个序列产生结合,其中疏水相互作用是驱动Mel与C-端结合的重要动力。同时,Mel能够大幅降低Aβ42原纤维N-端区域和C-端区域的结构稳定性,关于结合模式的分析显示,驱动Mel与N-端和C-端结合的主要动力分别是π-π堆积作用和疏水相互作用,并且在这些作用的共同影响下,Mel能够在很大程度上破坏原纤维N-端和C-端的β-sheet结构。（5）Trp和Trp＿Ser分别通过削弱Aβ42原纤维的整体稳定性和链间相互作用破坏原纤维稳定结构。Trp和Trp＿Ser都能够明显破坏原纤维N-端稳定的β-sheet结构,以此解聚Aβ42纤维,且Trp＿Ser的解聚效果更强。由于对疏水相互作用和盐桥相互作用的影响,Trp和Trp＿Ser分别对原纤维N-端和C-端的稳定结构产生更加明显的破坏。Trp和Trp＿Ser的结合位点几乎同样都位于原纤维的N-端。其中,与N-端带电氨基酸和N-端芳香氨基酸形成的氢键相互作用和丰富的π-π堆积,共同驱动了两个体系中小分子与原纤维之间的结合。
马慧慧[5]（2021）在《基于肾脑相关理论的温针灸治疗轻中度阿尔茨海默病临床研究》文中指出目的:本研究通过与改善阿尔茨海默病的基础药物“盐酸多奈哌齐片”的对照,观察基于肾脑相关理论,以督脉腧穴为主进行温针灸治疗轻、中度阿尔茨海默病患者的临床疗效。方法:在山西省针灸医院门诊及周边社区招募患者,根据纳入标准和排除标准,选取AD患者60例,按随机数字表,将其分为2组,对照组和治疗组各30例。对照组予以口服盐酸多奈哌齐片（5mg/d,每晚睡前,共3个疗程）;治疗组予以温针灸疗法（取穴:百会、大椎、命门、肾俞、悬钟、太溪）,根据不同的证型适当进行配穴（隔日1次,4周/疗程,共3个疗程）。所有入组患者在治疗前、后各进行观测和记录一次MMSE量表、ADAS-cog量表以及ADL量表评分情况,并观察治疗前后AD患者血清Hcy水平值的变化情况。本研究均采取SPSS25.0进行数据的统计分析。结果:（1）两组均可提升轻、中度AD患者的MMSE量表总分（P<0.05）,同时也可降低ADAS-cog量表、ADL量表总分（P<0.05）,说明在治疗轻中度AD患者方面,盐酸多奈哌齐、温针灸治疗两种治疗手段均具有临床疗效;（2）在疗效判定量表方面,两组治疗后治疗组临床疗效明显优于对照组（P<0.05）,说明通过温针灸疗法治疗轻、中度AD可提高患者认知功能和日常生活能力,且疗效优于盐酸多奈哌齐治疗;（3）在血清Hcy水平值变化方面,两组均可降低Hcy水平（P<0.05）,治疗后温针灸疗法在降低AD患者Hcy水平略低于盐酸多奈哌齐治疗,说明温针灸疗法在改善AD患者痴呆症状方面略优于盐酸多奈哌齐治疗;（4）两组患者治疗后有效率比较,治疗组显效有8例,有效有17例,总有效率为83.33%。对照组显效有4例,有效有14例,总有效率为60.00%。治疗组患者MMSE量表总有效率显着高于对照组,且差异有统计学意义（P<0.05）,说明温针灸疗法更能明显改善AD患者认知功能以及生活能力,且临床效果优于盐酸多奈哌齐治疗。结论:（1）在治疗轻、中度AD患者上,口服盐酸多奈哌齐、温针灸疗法两种治疗手段均具有临床疗效,且温针灸疗法优于盐酸多奈哌齐治疗;（2）基于肾脑相关理论,以督脉穴为主,温针灸疗法可明显改善轻、中度AD患者MMSE量表、ADAS-cog量表、ADL量表评分情况,可降低AD患者血清Hcy水平,能显着提高患者的认知能力,改善患者的生活质量,延缓疾病进程的发展,对降低AD患者的疾病负担具有重要的实际意义。
成乐[6]（2021）在《维生素D与老年人认知相关性及抗炎机制研究》文中研究指明目的:基于人群横断面调查与实验室检测对老年人认知与体内VD水平及炎症的相关性进行研究,并利用Aβ1-42诱导PC12细胞建立体外AD模型,探讨VD对AD细胞模型的抗炎机制,为认知障碍的抗炎防治提供科学依据。方法:本研究分为以下五部分:第一部分:老年人认知情况与体内血浆VD及炎症因子水平的病例对照研究1.认知度调查在山西省太原市采用流行病学分层整群随机抽样的方法,对迎泽区、杏花岭区、尖草坪区、万柏林区、小店区、晋源区6个区的老年人口分布密集社区65岁及以上的老年人进行问卷调查,蒙特利尔认知评估量表（Montreal Cognitive Assessment,Mo CA）评判得分后筛选出MCI组,同时选取同期社区认知正常的健康人群,根据病例-对照研究设计以年龄、性别、教育水平为匹配因素进行筛选。2.样本量计算样本量的确定根据1:1配比病例对照研究样本量公式计算,根据20102013中国全国营养与健康调查报道老年人的VD缺乏率为39.15%、α=0.05、β=0.10、OR=2进行计算,计算结果为N=176对,考虑到数据缺失的可能,确定样本量为180对,即360人。3.血样采集及检测前处理收集被调查老年人晨起空腹血样,收入5 ml EDTA抗凝采血管中,立即分离血浆和红细胞,并在-80℃冰箱中储藏。4.血浆25（OH）D3水平炎症因子IL-1β与IL-18水平检测采用酶联免疫法检测血浆25（OH）D3、炎症因子IL-1β与IL-18水平。目前国际推荐的VD缺乏程度分类标准为:25（OH）D3<10 ng/m L（<25nmol/L）为严重缺乏、<20 ng/m L（<50nmol/L）为缺乏、2129 ng/m L（5272nmol/L）为不足、≥30 ng/m L（≥75nmol/L）为充足。第二部分:老年认知障碍VD水平与炎症因子的相关性研究1.研究对象在前期病例对照研究的基础上,选择被纳为病例组的180例参与者为研究对象,按照VD缺乏与否（25（OH）D3水平<20 ng/m L）将纳入调查者分为VD充足组与VD缺乏组。2.血样采集及检测前处理收集被调查老年人晨起空腹血样,收入5 ml EDTA抗凝采血管中,立即分离血浆和红细胞,并在-80℃冰箱中储藏。第三部分:1,25（OH）2D3对Aβ1-42诱导PC12细胞焦亡的保护作用20μM Aβ1-42诱导PC12细胞构建细胞损伤模型,设立对照组、模型组（20μM Aβ1-42）、1,25（OH）2D3低剂量组（1 n M 1,25（OH）2D3+20μM Aβ1-42）、1,25（OH）2D3中剂量组（10 n M 1,25（OH）2D3+20μM Aβ1-42）及1,25（OH）2D3高剂量组（100 n M1,25（OH）2D3+20μM Aβ1-42）。CCK-8法检测PC12细胞的存活率,AO/EB双荧光染色检测细胞膜通透性,生化法检测细胞LDH释放率,ELISA检测细胞IL-1β、IL-18含量,细胞免疫荧光、Western Blot检测焦亡通路相关蛋白。第四部分:Aβ1-42诱导PC12细胞焦亡机制研究采用si RNA转染技术抑制Caspase-1蛋白的表达,设立对照组、模型组（20μM Aβ1-42）、Caspase-1-si RNA组（50 n M Caspase-1-si RNA+20μM Aβ1-42）、NC-si RNA组（50 n M NC-si RNA+20μM Aβ1-42）、1,25（OH）2D3剂量组（100 n M 1,25（OH）2D3+20μM Aβ1-42）、Caspase-1-si RNA+1,25（OH）2D3剂量组（50 n M Caspase-1-si RNA+100n M 1,25（OH）2D3+20μM Aβ1-42）。细胞免疫荧光、Western Blot检测焦亡通路相关蛋白,AO/EB双荧光染色检测细胞膜通透性,生化法检测细胞LDH释放率,ELISA检测细胞IL-1β、IL-18含量。结果:第一部分:老年人认知情况与体内血浆VD及炎症因子水平的病例对照研究本次病例对照研究共纳入社区老年人360例,平均年龄在（73.06±5.53）岁,其中女性181人（50.3%）,男性179人（49.7%）,根据Mo CA得分情况,将接受调查的老年人分为正常组（n=180）及MCI组（n=180）。对两组老年人Mo CA总分及各项得分进行比较后发现,MCI组在Mo CA总分、视空间、命名、注意力、语言、抽象、回忆及定向力上得分均低于正常（Normal Control,NC）组,差异具有统计学意义（P<0.001）。对两组老年人的人口学特征、生活方式及健康状况进行比较后发现,NC组和MCI组在性别（P=0.916）、年龄（P=0.342）以及教育程度（P=0.070）上的差异均无统计学意义,两组间均衡可比。在其他人口学特征、生活方式及健康状况方面,两组间也均无统计学意义（P>0.05）。本次病例对照研究所调查的360名老年人25（OH）D3平均浓度为14.43（11.58,18.17）ng/m L,其中25（OH）D3水平严重缺乏者16例（4.4%）,缺乏者271例（75.3%）,不足者39例（10.9%）,充足者34例（9.4%）,缺乏及严重缺乏者占比高达79.7%。正常组和认知障碍组25（OH）D3水平分别为14.78（11.81,20.46）ng/m L和14.16（11.31,17.38）ng/m L,将两组总体水平进行比较之后发现,认知障碍组25（OH）D3水平显着低于正常组,差异有统计学意义（P=0.031）。老年人炎症因子IL-1β水平中位数为6.66 pg/m L（5.96 pg/m L,7.41 pg/m L）,其中NC组IL-1β水平中位数为6.12 pg/m L（5.58 pg/m L,6.68 pg/m L）,MCI组IL-1β水平中位数为7.20 pg/m L（6.63 pg/m L,7.95 pg/m L）,与NC组相比,MCI组老年人体内血浆炎症因子IL-1β水平明显增高,差异有统计学意义（P<0.001）。总体炎症因子IL-18水平中位数为229.88 pg/m L（206.63 pg/m L,259.42 pg/m L）,其中NC组IL-18水平中位数为214.51 pg/m L（186.61 pg/m L,247.63 pg/m L）,MCI组IL-18水平中位数为246.92 pg/m L（222.5pg/m L,277.11 pg/m L）,与NC组相比,MCI组老年人体内血浆炎症因子IL-18水平明显增高,差异有统计学意义（P<0.001）。对不同认知水平老年人的认知Mo CA总评分及各个认知维度得分与其25（OH）D3水平进行Spearman相关分析发现,老年人血浆25（OH）D3水平与Mo CA评分呈正相关,相关系数r=0.257,P<0.001。与认知各个维度得分的相关性结果显示,在抽象及回忆的认知维度中,与25（OH）D3水平呈正相关,相关系数r=0.121,P=0.022;r=0.131,P=0.013。IL-1β水平与Mo CA评分呈负相关,相关系数r为-0.440,P<0.001,IL-18水平与Mo CA评分呈负相关,相关系数r为-0.434,P<0.001。与认知各个维度得分的相关性结果显示,在各个认知维度中,均与二者呈负相关。以认知分组为因变量,其他因素为自变量,对认知障碍的影响因素进行多因素logistic回归分析。结果显示,糖尿病、收入水平、BMI和VD与认知障碍的发生有关,其中糖尿病（OR=1.987,95%CI:1.0543.744）与认知障碍的发生风险呈正相关,为认知的危险性因素;收入水平（OR=0.823,95%CI:0.6840.990）、BMI（OR=0.687,95%CI:0.5130.918）和VD（OR=0.366,95%CI:0.2490.538）与认知障碍的发生风险呈负相关,为认知的保护性因素。在多因素logistic回归模型中,以认知分组为因变量,以炎症因子IL-1β与IL-18水平为自变量进行分析,在对年龄、性别、文化程度、收入水平、BMI、是否患高血压、糖尿病、高血脂、是否吸烟、饮酒、锻炼等变量进行调整后,发现炎症因子IL-1β水平在Q2、Q3、Q4者的认知功能障碍患病风险分别为得分在Q1者的4.221倍、7.848倍与12.619倍（Q2:OR2=4.221,95%CI2:2.0318.773;Q3:OR2=7.848,95%CI2:3.74016.465;Q4:OR2=12.619,95%CI2:5.88927.040）是认知障碍的危险因素,炎症因子IL-18水平在Q4者的认知功能障碍患病风险为得分在Q1者的3.373倍（Q4:OR2=3.373,95%CI2:1.7366.553）。在多因素logistic回归模型中,以认知分组为因变量,以炎症因子IL-1β与IL-18水平为自变量进行分析,在对年龄、性别、文化程度、收入水平、BMI、是否患高血压、糖尿病、高血脂、是否吸烟、饮酒、锻炼等变量进行调整后,发现炎症因子IL-1β水平在Q2、Q3、Q4者的认知功能障碍患病风险分别为得分在Q1者的4.221倍、7.848倍与12.619倍（Q2:OR2=4.221,95%CI2:2.0318.773;Q3:OR2=7.848,95%CI2:3.74016.465;Q4:OR2=12.619,95%CI2:5.88927.040）是认知障碍的危险因素,炎症因子IL-18水平在Q4者的认知功能障碍患病风险为得分在Q1者的3.373倍（Q4:OR2=3.373,95%CI2:1.7366.553）。第二部分:老年认知障碍VD水平与炎症因子的相关性研究在前期病例对照研究的基础上,选择被纳为病例组的180例参与者为研究对象,按照VD缺乏与否（25（OH）D3<20 ng/m L）将纳入调查者分为VD充足组与VD缺乏组。对两组老年人的人口学特征、生活方式及健康状况进行比较后发现,VD充足组和VD缺乏组在一般调查数据方面均无统计学意义（P>0.05）。本次研究所选择的180名认知障碍老年人炎症因子IL-1β水平中位数为6.39pg/m L（5.77 pg/m L,7.36 pg/m L）,其中VD充足组IL-1β水平中位数为5.58 pg/m L（5.05 pg/m L,6.12 pg/m L）,VD缺乏组IL-1β水平中位数为6.61 pg/m L（5.85 pg/m L,7.56 pg/m L）,与VD充足组相比,VD缺乏组老年人体内血浆炎症因子IL-1β水平明显增高,差异有统计学意义（P=0.016）。总体炎症因子IL-18水平中位数为222.56pg/m L（187.57 pg/m L,255.62 pg/m L）,其中VD充足组IL-18水平中位数为185.98pg/m L（172.64 pg/m L,208.49 pg/m L）,VD缺乏组IL-18水平中位数为228.66 pg/m L（201.83,257.93 pg/m L）,与VD充足组相比,VD缺乏组老年人体内血浆炎症因子IL-18水平明显增高,差异有统计学意义（P=0.036）。对纳入研究的认知障碍老年人的体内血浆25（OH）D3水平与炎症因子IL-1β及IL-18水平进行Spearman相关分析发现,老年人血浆25（OH）D3水平与IL-1β水平呈负相关,相关系数r=-0.168,P=0.025;血浆25（OH）D3水平与IL-18水平呈负相关,相关系数r=-0.257,P<0.001。在多因素logistic回归模型中,以炎症因子IL-1β、IL-18水平四分位数为因变量,以VD状态为自变量进行分析,在对年龄、性别、文化程度、收入水平、BMI、是否患高血压、糖尿病、高血脂、是否吸烟、饮酒、锻炼等变量进行调整后,发现VD缺乏者的高炎症因子水平发生风险是VD充足者的4.066倍（Q4:OR2=4.066,95%CI2:1.6549.995）,未见VD缺乏与炎症因子IL-1β之间存在相关联系。第三部分:1,25（OH）2D3对Aβ1-42诱导PC12细胞焦亡的保护作用根据CCK-8实验结果选择20μM Aβ1-42与1、10、100 n M 1,25（OH）2D3干预剂量进行后续的实验。与对照组相比,模型组细胞存活率明显降低（P（27）0.01）。与模型组比,1、10、100 n M 1,25（OH）2D3干预组细胞存活率有显着提高（P<0.05或P<0.01）。AO/EB染色结果发现,与对照组相比,细胞死亡率显着增加（P（27）0.01）。与模型组相比,1 n M 1,25（OH）2D3干预组细胞死亡率有所降低,10 n M 1,25（OH）2D3与100 n M 1,25（OH）2D3干预组细胞死亡率降低更为明显（P<0.05或P<0.01）。100 n M1,25（OH）2D3干预组细胞死亡率较1 n M 1,25（OH）2D3与10 n M 1,25（OH）2D3干预组降低更为显着（P（27）0.01、P（27）0.05）。与对照组相比,模型组LDH释放与IL-1β、IL-18分泌显着增多（P（27）0.01）,与模型组相比,1 n M、10 n M和100 n M 1,25（OH）2D3预处理的干预组细胞LDH释放与IL-1β、IL-18分泌显着降低（P（27）0.01）,其中100n M 1,25（OH）2D3干预组细胞LDH释放率与IL-1β、IL-18分泌水平较1 n M和10 n M改善作用显着增强（P（27）0.01,P（27）0.05）。通过对ASC与Caspase-1蛋白荧光强度半定量分析发现,与对照组相比,模型组蛋白荧光强度高（P（27）0.01）;与模型组细胞相比,1 n M 1,25（OH）2D3预处理的干预组细胞ASC蛋白荧光强度无显着差异（P（29）0.05）,Caspase-1蛋白荧光强度降低（P<0.05）,10 n M和100 n M 1,25（OH）2D3预处理的干预组细胞两种蛋白荧光强度显着减弱（P（27）0.01）;在100 n M 1,25（OH）2D3干预组细胞中降低较1 n M 1,25（OH）2D3干预组更为显着（P（27）0.01）。Western Blot结果显示,与对照组相比,模型组细胞NLRP1、ASC、Pro-Caspase-1、Caspase-1与GSDMD-N蛋白表达水平显着下降（P（27）0.01）。模型组细胞相比,1 n M1,25（OH）2D3预处理的干预组细胞NLRP1蛋白表达无显着差异（P（29）0.05）,10 n M和100 n M 1,25（OH）2D3组表达水平显着降低（P（27）0.01）;1 n M和10 n M 1,25（OH）2D3组Pro-Caspase-1蛋白表达无显着差异（P（29）0.05）,100 n M 1,25（OH）2D3组表达水平显着降低（P（27）0.01）;3个干预组细胞ASC、Caspase-1、GSDMD-N蛋白表达水平显着降低（P（27）0.01）;100 n M 1,25（OH）2D3干预组细胞NLRP1、ASC、Pro-Caspase-1、Caspase-1与GSDMD-N蛋白表达水平较1 n M和10 n M 1,25（OH）2D3干预组更为显着（P（27）0.05或P（27）0.01）。第四部分:Aβ1-42诱导PC12细胞焦亡机制研究通过对ASC与Caspase-1蛋白荧光强度半定量分析发现,与对照组相比,Aβ1-42组蛋白荧光强度高（P（27）0.01）;与Aβ1-42组细胞相比,Caspase-1-si RNA组细胞ASC蛋白荧光强度无显着差异（P（29）0.05）,1,25（OH）2D3干预组与Caspase-1-si RNA+1,25（OH）2D3干预组细胞ASC与Caspase-1蛋白荧光强度显着减弱（P（27）0.01）;在100 n M 1,25（OH）2D3干预组细胞中降低较1 n M 1,25（OH）2D3干预组更为显着（P（27）0.01）。NC-si RNA组与Caspase-1-si RNA组相比,两种蛋白荧光强度较强（P（27）0.01）,与Aβ1-42组相比无统计学差异（P>0.05）。Western Blot结果显示,与对照组相比,Aβ1-42组细胞NLRP1、ASC、Pro-Caspase-1、Caspase-1与GSDMD-N蛋白表达水平显着下降（P（27）0.05或P（27）0.01）。与Aβ1-42组细胞相比,NLRP1、ASC蛋白在1,25（OH）2D3与Caspase-1-si RNA+1,25（OH）2D3干预组表达水平显着降低（P（27）0.01）;Pro-Caspase-1蛋白在Caspase-1-si RNA与Caspase-1-si RNA+1,25（OH）2D3干预组表达水平显着降低（P（27）0.01）;Caspase-1与GSDMD-N蛋白在Caspase-1-si RNA、1,25（OH）2D3与Caspase-1-si RNA+1,25（OH）2D3干预组表达水平显着下降（P（27）0.01）。与Caspase-1-si RNA干预组相比,NLRP1、ASC蛋白在1,25（OH）2D3与Caspase-1-si RNA+1,25（OH）2D3干预组表达水平显着降低（P（27）0.01）;Pro-Caspase-1、Caspase-1与GSDMD-N蛋白在Caspase-1-si RNA干预组中相比NC-si RNA干预组降低更为明显（P（27）0.01）;GSDMD-N蛋白在Caspase-1-si RNA+1,25（OH）2D3干预组中较Caspase-1-si RNA干预组表达较低（P（27）0.05）。AO/EB染色结果发现,与对照组相比,Aβ1-42组细胞死亡率显着增加（P（27）0.01）与Aβ1-42组相比,Caspase-1-si RNA组、1,25（OH）2D3组与Caspase-1-si RNA+1,25（OH）2D3组红色荧光减少,细胞死亡率降低（P（27）0.01）。NC-si RNA组与Caspase-1-si RNA组相比,红色荧光强（P（27）0.01）,与Aβ1-42组相比无统计学差异（P>0.05）。与对照组相比,Aβ1-42组LDH释放与IL-1β、IL-18分泌显着增多（P（27）0.01）。与Aβ1-42组相比,Caspase-1-si RNA组、1,25（OH）2D3组与Caspase-1-si RNA+1,25（OH）2D3组细胞LDH释放与IL-1β、IL-18分泌显着降低（P（27）0.01）。NC-si RNA组与Caspase-1-si RNA组相比有统计学意义（P（27）0.01）,与Aβ1-42组相比无统计学差异。Caspase-1-si RNA+1,25（OH）2D3组IL-1β分泌水平低于Caspase-1-si RNA组（P（27）0.05）。结论:1、本研究所调查的360名太原市6社区老年人维生素D缺乏现象比较普遍,缺乏及严重缺乏者比例为79.7%,不足者比例为8.3%,充足为17.8%;老年人MCI患者血浆25（OH）D3水平显着低于正常老年人血浆25（OH）D3水平,且认知水平与血浆25（OH）D3水平呈正相关;老年人MCI患者血浆IL-1β与IL-18水平显着高于正常老年人,且认知水平与血浆IL-1β与IL-18水平呈负相关;患糖尿病是发生认知障碍的危险因素,较高的收入水平与VD水平是认知的保护性因素,正常偏胖体型较消瘦者认知更好,老年人血浆高水平的IL-1β与IL-18是认知障碍的发生的危险因素。2、VD缺乏组认知障碍老年人体内血浆炎症因子IL-1β与IL-18水平水平高于VD充足组认知障碍老年人;认知障碍老年人血浆25（OH）D3水平与IL-1β与IL-18水平呈负相关,且VD缺乏是认知障碍老年人血浆炎症因子IL-18高水平的危险因素。3、Aβ1-42能够诱导的PC12细胞发生细胞焦亡现象,1,25（OH）2D3能通过抑制Aβ1-42诱导的PC12细胞发生焦亡来发挥神经保护作用。4、使用si RNA抑制Caspase-1的表达会抑制焦亡关键成孔蛋白的表达,减少细胞膜的破损与LDH、IL-1β、IL-18的成熟与释放。
任许利[7]（2021）在《七氟醚通过上调水通道蛋白4表达增加小鼠胶质淋巴系统功能的机制研究》文中认为研究背景:脑胶质淋巴系统是介于大脑脉管系统和星形胶质细胞之间的特殊血管旁间隙,起到运输脑脊液和排出脑内废物的功能。由于该血管周围间隙的功能和结构与胶质细胞密切相关,并发挥类似淋巴系统功能,故命名为胶质淋巴系统。在胶质淋巴系统中脑脊液流动可将营养物质和药物输送到脑实质,并从大脑深处快速清除代谢废物,如乳酸和β-淀粉样蛋白（Aβ）。当胶质淋巴系统功能障碍时,毒性代谢产物排出能力降低,导致废物在脑实质内积累,在脑实质内积累,引发神经炎症反应,最后出现认知功能障碍。同时,胶质淋巴系统功能还有免疫调节作用,也可参与神经炎症反应。因此,现认为胶质淋巴系统功能障碍可能与许多神经退行性疾病有关。围术期认知功能障碍作为一种与手术和麻醉相关神经性疾病,与很多神经退行性疾病有一定相似性。例如,一些研究证明,患者脑脊液Aβ聚集和Aβ/tau比值增加可能与术后长期认知改变有关。因此,我们推测胶质淋巴系统与围术期认知功能障碍之间可能存在一定病理因果关系。目前,大量临床研究表明吸入麻醉药与术后认知功能改变具有明显相关性。其中,七氟醚是目前临床麻醉中最常用的吸入麻醉药。因此,本实验中我们选择4%七氟醚作为研究因素,研究七氟醚对胶质淋巴系统功能和小鼠行为学改变影响,并浅探其诱发认知功能障碍的相关机制。方法:第一部分为动物实验:首先研究七氟醚对小鼠的行为学和脑胶质淋巴系统功能的影响。术前3天为Morris水迷宫的位置导航测验阶段（即参考记忆测试）,每天让小鼠是熟悉适应环境4次。手术当天将小鼠分为对照组和七氟醚组的两组,行小脑延髓池内注射伊文思蓝。然后,对照组小鼠保持清醒和自由活动,而七氟醚组则继续维持七氟醚（4%）麻醉。在维持4 h后七氟醚麻醉结束,再经过4 h复苏后,两组小鼠都完全清醒并能自由活动。所有小鼠进行旷场实验和水迷宫行为学测试。待行为学测试完毕后,小鼠都立刻安乐死并解剖大脑,观察大脑表面伊文思蓝的多少,推测七氟醚对胶质淋巴系统功能的变化。其次,评估新型水通道蛋白4抑制剂（TGN-020）对小鼠的胶质淋巴系统和行为学的影响。此实验结果显示TGN-020在短期内只发挥特异性抑制AQP4的作用,正常情况下单次对中枢神经影响较小,不会明显改变小鼠行为学。所以后续实验中不再单独设立TGN组。最后,在七氟醚麻醉状态下,研究TGN-020是否影响胶质淋巴系统功能,以及是否能改善七氟醚麻醉造成的行为改变。此时将小鼠分成三组,分别为对照组,七氟醚组和七氟醚+TGN组三组小鼠,分别行小脑延髓池穿刺术注射伊文思蓝,以便观察胶质淋巴系统功能和小鼠认知行为学的变化。通过体内近红外荧光成像技术观测三组脑组织内的总荧光含量;通过免疫荧光分光光度计测量三组血清中的伊文思蓝含量,检测伊文思蓝经胶质淋巴系统回流入血液循环的多少。通过酶联免疫吸附试验（ELISA法）检测三组血清IL-6的表达。之后,通过荧光免疫学方法检测脑内水通道蛋白4的表达。第二部分为细胞实验:利用星形胶质细胞浅探七氟醚增加胶质淋巴系统功能的相关机制。通过蛋白免疫印迹（Western blotting法）和细胞免疫荧光检测水通道蛋白4的表达。通过蛋白免疫印迹（Western blotting法）观察蛋白激酶C（PKC）在星形胶质细胞中的表达。通过酶联免疫吸附试验（ELISA法）检测星形胶质细胞的IL-6的表达。通过氮蓝四唑显色法去检测超氧化物歧化酶的含量。通过细胞膜片钳技术观察七氟醚和TGN-020对星形胶质细胞膜总钾通道电导性的影响。最后实验组和对照组之间的统计比较是通过单因素方差分析（ANOV A）进行的统计。结果:1.在经过4%七氟醚麻醉4h后,小鼠在麻醉复苏早期（苏醒后4h）表现出明显的行为改变。4%七氟醚明显增加胶质淋巴系统功能。2.小脑延髓池穿刺明显增加小鼠IL-6的分泌,而七氟醚引起的炎症相对较弱。3.七氟醚可增加小鼠脑内水通道蛋白4和PKC表达,降低SOD的含量进而减弱对超氧化物的清除作用。同时七氟醚还降低星形胶质细胞钾道开放水平。4.TGN-020作为新型水通道蛋白4抑制剂,明显抑制胶质淋巴系统功能。在单次使用8h内不会引起小鼠出现明显行为学改变。5.在4%七氟醚麻醉过程中,TGN-020能发挥抑制胶质淋巴系统功能。还可以缓解七氟醚对钾通道的抑制作用,改善因七氟醚麻醉引起的行为学异常。结论:1.高浓度七氟醚可增强胶质淋巴系统功能,其机制可能与上调星形胶质细胞的水通道蛋白4和PKC的表达有关。2.胶质淋巴系统功能增加可引起过多炎症物质随脑脊液入脑,引起神经性炎症,导致小鼠行为学改变。3.TGN-020作为一种新型的水通道蛋白4特异性抑制剂,可抑制七氟醚引起的胶质淋巴系统功能亢进,并改善小鼠的行为改变。
朱晓婷[8]（2021）在《解毒益智方对阿尔茨海默病双转基因小鼠行为学及大脑皮层内β-淀粉样蛋白沉积及BACE1表达影响的研究》文中指出选题依据:阿尔茨海默病（AD）致残、致死率高,发病机制复杂,大脑内Aβ异常沉积是AD发生发展的重要病理变化及核心环节,前期研究已证实了解毒益智方具有抑制AD线虫头部Aβ斑块沉积及相关基因表达的作用,随之开展的随机对照临床研究证实解毒益智方应用6个月后MMSE、MoCA、ADL评分变化明显优于口服尼莫地平片的对照组。黄连为解毒益智方中的君药,为该方的主要成分,在本方中发挥“解毒”的重要功效。经查阅国内外文献发现黄连中发挥“解毒”作用的主要物质为黄连多糖（CCP）,因此设计体外细胞实验探究解毒益智方中的君药黄连的主要有效成分CCP对Aβ25-35损伤PC12的保护作用,为“毒损”的病机及“解毒”的治法提供理论依据,为后续研究提供研究基础。因前期开展的研究均是以单基因单细胞的生物为研究对象,不能很好地模拟AD的疾病特点,因此选用APP/PS1双转基因小鼠作为研究对象,该小鼠很好的模拟了中枢神经系统Aβ异常沉积的状态,通过对小鼠的行为学研究及分子生物学研究,进一步评价解毒益智方的治疗作用。目的:通过体外细胞实验探讨基于“补肾益髓、活血化痰解毒”法形成的解毒益智方其中君药的有效成分CCP对Aβ25-35损伤PC12的保护作用。通过行为学、分子生物学等研究手段,对APP/PS1小鼠的认知功能、Aβ沉积、BACE1表达的相关蛋白、基因等方面进行检测和分析,探讨解毒益智方对APP/PS1小鼠的作用机制,为中药治疗AD的推广应用提供可靠的研究证据。方法:1.本研究分别从体外实验、动物实验探究解毒益智方的作用机制。体外实验部分采用MTT还原法、Hoechst33258荧光染色等方法对Aβ25-35诱导的PC12细胞损伤模型进行线粒体活性、细胞活力、细胞凋亡的测定,探究CCP对PC12细胞的保护作用。动物实验部分选用APP/PS1双转基因小鼠为研究对象,随机分为5组,分别是模型组（APP/PS1组）、盐酸多奈哌齐组（Donepezil组）、解毒益智方低剂量组（JDYZFL组）、解毒益智方中剂量组（JDYZFM组）、解毒益智方高剂量组（JDYZFH组）,每组16只小鼠,另选用16只C57小鼠作为正常对照组（Control组）,于每日早晨8:30进行灌胃治疗,各组每日灌胃药物及剂量分别是,正常组和模型组0.5%CMC溶液0.20g·kg-1·d-1;阳性对照组:盐酸多奈哌齐溶液0.30g·kg-1·d-1;解毒益智方高、中、低剂量组药物浓度依次为0.60g·kg-1·d-1,0.3g·kg-1·d-1,0.15g·kg-1·d-1。持续6个月治疗结束。2.以Aβ25-35损伤的PC12细胞为研究对象,通过测定细胞活力、LDH释放率、细胞凋亡率、和线粒体膜电位的水平等评价CCP的神经保护作用。3.通过水迷宫实验,记录解毒益智方对APP/PS1小鼠学习记忆能力的影响。4.通过ELISE及免疫荧光法检测APP/PS1小鼠脑内Aβ水平的变化,观察解毒益智方对APP/PS1小鼠脑内Aβ沉积的影响。5.采用PCR方法检测脑组织SIRT1、NF-κB、BACE1基因量变化,并进一步采用Western blot方法检测大脑皮层内SIRT1、BACE1、NF-κB蛋白的变化,观察解毒益智方对APP/PS1小鼠脑内AMPK/SIRT1-PPARγ-PGC1α-BACE1转运蛋白通路SIRT1、BACE1、NF-κB的影响。结果:1.通过体外研究观察CCP对Aβ25-35诱导的PC12细胞损伤的影响PC12细胞活力测定结果显示:PC12细胞经过浓度为5-50μM的Aβ25–35处理24h后,细胞活力随着Aβ25–35浓度的增加从24%下降至61%。当Aβ25–35在浓度范围为5至50μM时引起PC12细胞中LDH释放增加至对照组的约130-160%。在用不同浓度的CCP（5至200μg/ml）处理PC12细胞24h后,未观察到显着的细胞损失。通过Hoechst33258染色及FCM测定细胞凋亡结果显示:细胞核在荧光显微镜下具有显着的浓缩核和凋亡的细胞形成。与在未处理的PC12细胞中观察到的完整,圆形和相对大的细胞核相比,暴露于50μMAβ25–35 24h的细胞显示出典型的细胞凋亡特征,包括染色质浓缩,核碎裂和凋亡小体的出现。用CCP不同浓度（5,25,50,100,200μg/ml）处理后可有效逆转细胞凋亡,其中100μg/ml效果最明显,FCM分析显示单独暴露于50μMAβ25–35 24h导致58.88±6.12%的凋亡率,这与正常对照组中的7.21±0.82%的值显着不同（P<0.01）。加入100μg/ml的CCP后,细胞凋亡下降至12.51±1.32%。通过JC-1红色荧光与JC-1绿色荧光的比率的变化来检测Aβ诱导的线粒体功能障碍结果显示:当PC12细胞暴露于50μM的Aβ25–35中24h后,与正常对照组相比,显着减弱了JC-1的红色荧光比例,提高了JC-1绿色荧光比例（P<0.01）。用CCP（100μg/ml）预处理Aβ25–35处理的PC12细胞显着抵消了Aβ25–35损伤引起的膜电位损失,JC-1从Aβ25–35处理的PC12细胞中的22.1%变为绿色荧光至84.3%,与正常对照组相近（P>0.05）。通过蛋白质印迹法检测细胞色素C结果显示:经50μMAβ25–35处理PC12细胞24h后细胞色素C在细胞质中的蛋白质表达增加,而预先用CCP（100μg/ml）处理的PC12细胞显着减弱线粒体释放的胞质细胞色素C。2.观察JDYZF对APP/PS1双转基因小鼠学习记忆能力的影响。水迷宫实验结果显示:随着实验天数的后移,各组小鼠潜伏期、路径长度、游泳距离均有所缩短,表明随着训练次数的增加各组小鼠对象限平台的定位记忆能力随之有所提升。与Control组相比,APP/PS1组逃避潜伏期、路径长度、游泳距离均明显延长,差异显着（P<0.01）。首次到达平台的时间明显延长,目标停留次数明显减少,差异显着（P<0.01）。与APP/PS1组相比,Donepezil组、JDYZFL组、JDYZFM组逃避潜伏期、路径长度、游泳距离有所缩短,差异有统计学意义（P<0.05,P<0.01）。首次到达平台的时间缩短,目标停留次数增多,差异有统计学意义（P<0.05,P<0.01）。与Donepezil组相比,JDYZFL组作用与其相当,JDYZFM组略优于Donepezil组,差异有统计学意义（P<0.05）。干预治疗6个月的12月龄小鼠的定位航行实验及空间搜索实验结果优于干预治疗3个月的9月龄小鼠,差异有统计学意义（P<0.05）。3.观察JDYZF对APP/PS1双转基因小鼠脑内Aβ沉积的影响。各组小鼠结果如下:与Control组比较,APP/PS1组大脑皮层内可溶性及不可溶性Aβ1-40、Aβ1-42沉积极数量明显增多,具有极显着统计学意义（P<0.01）。与APP/PS1组相比,JDYZFL组、JDYZFM组及Donepezil组大脑皮层内可溶性及不可溶性Aβ1-40、Aβ1-42沉积数量不同程度降低,具有统计学意义（P<0.05,P<0.01）。与Donepezil组比较,JDYZFM组大脑皮层内可溶性及不可溶性Aβ1-40、Aβ1-42沉积数量有所降低,差异具有统计学意义（P<0.05）。通过免疫荧光法测得小鼠大脑皮层内Aβ表达发现,Control组只产生微量Aβ,而APP/PS1组Aβ表达量明显增高,经过用药干预后,12月龄干预组小鼠可溶性及不可溶性Aβ1-40、Aβ1-42沉积数量较9月龄小鼠明显减少,免疫荧光标记从宏观上可以发现干预组Aβ沉积明显减少,APP/PS1组Aβ沉积明显增多。4.调控BACE1表达的相关因子结果（1）PCR检测结果各组小鼠进行的PCR检测结果显示:与Control组相比,APP/PS1组小鼠大脑皮层内BACE1/GAPDH、NF-κB/GAPDH表达含量明显增高,SIRT1/GAPDH明显降低,差异有显着统计学意义(（P<0.01）。与APP/PS1组相比,Donepezil组、JDYZFL组及JDYZFM组小鼠海马体内BACE1/GAPDH、NF-κB/GAPDH表达含量不同程度降低,SIRT1/GAPDH表达含量不同程度增高,差异具有统计学意义（P<0.05,P<0.01）。JDYZFH组在NF-κB/GAPDH表达上无统计学差异。与Donepezil组相比,JDYZFL组及JDYZFM组BACE1/GAPDH、NF-κB/GAPDH表达含量不同程度降低,差异具有统计学意义（P<0.05）。PCR结果证实药物干预组可通过提高SIRT1mRNA的含量降低NF-κBmRNA、BACE1mRNA的表达,从而抑制Aβ的产生而起到神经保护的作用。各治疗组大脑皮层Aβ的表达均有所降低。连续灌胃6个月的各组小鼠与连续灌胃3个月的小鼠相比,除APP/PS1组及Control组,其他各组SIRT1mRNA的表达均有所提高,NF-κBmRNA、BACE1mRNA的表达均有所降低,差异具有统计学意义（P<0.05）。（2）Westorn blot检测结果各组小鼠的Western blot检测结果显示:与Control组相比,APP/PS1组小鼠大脑皮层SIRT1的蛋白表达明显降低,NF-κB、BACE1蛋白表达显着升高（P<0.01）。与APP/PS1相比,Donepezil组、JDYZFL组、JDYZFM组BACE1、NF-κB表达降低,SIRT1蛋白表达增高差异有统计学意义（P<0.05）。与Donepezil比较,JDYZFL组、JDYZFM组NF-κB蛋白表达有所降低,差异有统计学意义（P<0.05）。JDYZFL组SIRT1、BACE1蛋白表达无显着差异,JDYZFM组SIRT1表达有所提高,BACE1蛋白表达量略有降低,差异有统计学意义（P<0.05）。经过为期3个月及6个月的干预后,各治疗组大脑皮层Aβ的表达均有所降低。连续灌胃6个月的各组小鼠与连续灌胃3个月的小鼠相比,除APP/PS1组及Control组,其他各组SIRT1的蛋白表达均有所提高,NF-κB、BACE1蛋白的表达均有所降低,差异具有统计学意义（P<0.05）。结论:1 CCP能够保护Aβ25-35损伤的PC12细胞,其机制可能与提高细胞活力、抑制细胞凋亡、减少LDH释放、阻断膜电位的丧失,并阻止线粒体细胞色素C释放,修复线粒体功能障碍有关。2 JDYZF各剂量组可不同程度提高APP/PS1双转基因小鼠定位航行实验及空间搜索实验的成绩,说明JDYZF可改善小鼠空间学习及记忆能力。3 JDYZF可不同程度降低APP/PS1双转基因小鼠大脑皮层内Aβ的异常沉积。4 JDYZF抑制BACE1的异常表达,其作用机制可能是通过调控大脑内AMPK/SIRT1-PPARγ-PGC1α-BACE1信号通路的相关因子表达实现的。
朱立猛[9]（2021）在《壳寡糖对阿尔茨海默病的作用效果评价及其机制初探》文中研究表明阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease,AD）是一种起病隐匿的进行性发展的中枢神经系统退行性疾病,临床表现主要为认知和记忆障碍。从被发现至今,人们对AD的相关研究已经取得了巨大的进展,众多研究数据表明,AD的发病可能由多种因素共同参与,导致其病程漫长,病理机制十分复杂,且尚未有根治的方法。现有药物主要是缓解症状,不能阻止或者逆转疾病的发展。由于病理机制不明确,导致传统的治疗策略很难有效控制或治愈包括AD在内的多种复杂疾病。近年来,AD的治疗策略也逐渐发生变化,从单一治疗策略到多环节整体观的治疗策略。相对于单一的治疗策略,多环节整体观的治疗可针对疾病的不同生理环节发挥作用并且具有不良反应少、疗效显着等优点。天然产物及其衍生物由于生物利用度高、毒副作用小且大多具有多功能的特性而备受关注。因此,将具有良好生物活性的天然产物用于AD相关的治疗或许可以成为一种有效可行的策略。壳寡糖（Chitosan oligosaccharide,COS）是自然界中唯一带正电荷阳离子碱性氨基低聚糖,具有多种生物活性,在生物医药和功能食品领域表现出了良好的应用前景,且COS在过去的许多研究中都被证明具有良好的神经保护作用。本论文通过细胞和动物实验,评价了 COS对于AD的改善作用,并探究了其相关作用机制,为合理地将COS用于AD的治疗提供一定理论依据。论文具体开展的工作如下:1)COS在过去的许多研究中都被证明具有良好的神经保护作用,然而相关的研究存在许多不足。绝大多数的研究仅利用体外细胞模型进行相关实验验证,但是关于COS是否可以穿透血脑屏障（Blood brain barrier,BBB）进入大脑发挥其神经保护作用依然是个未知数。针对该问题,本研究构建了两种由单层微血管内皮细胞组成的体外BBB模型:静态Transwell模型和动态微流控芯片模型,并利用以上两种模型探究了 COS能否透过单层微血管内皮细胞构成的BBB。初步证明COS具有良好的BBB透过性,且葡萄糖转运蛋白1（Glucose transporterl,GLUT-1）是其通过BBB的转运载体之一。此外,利用荧光标记与活体成像联用的技术,在活体动物上验证了 COS可以透过BBB进入大脑。2)β淀粉样蛋白（Amyloid β-protein,Aβ）自聚集生成富含β-sheet结构的有序聚集体,是导致AD的罪魁祸首。因此,通过影响Aβ的聚集来降低Aβ诱导产生的神经毒性可能是治疗AD的一种有效途径。本研究发现COS可以通过影响Aβ42的聚集来降低其诱导产生的细胞凋亡、氧化应激和炎症因子的释放。其作用机制为:COS能够通过静电作用和疏水相互作用结合在Aβ42寡聚体上,结合后会进一步破坏β-sheet结构,并使其转变为β-turn和Coil结构。该变化会扰乱Aβ42自身所具有的分子内结合作用,破坏Aβ42寡聚体的固有结构,使其稳定性降低,进而促进已经聚集的Aβ42纤维体解聚。除此之外,COS的结合占据了 Aβ42聚集体表面的某些特定位点,导致Aβ42聚集过程中无法向正常方向延长,从而有效地抑制Aβ42的聚集。以上作用能够显着降低Aβ42诱导产生的神经毒性。此外,COS的该作用与其剂量、聚合度和脱乙酰度成正比,-NH2基团在二者相互作用的过程中发挥了重要的作用。3)肠道菌群在AD的发生和发展有中发挥着重要的作用。通过个性化益生元干预来调节肠道微生物群可能成为治疗AD的新方法。本研究通过动物实验,探究了 COS能否通过调节肠道菌群和其代谢产物改善AD相关病理症状。结果表明,COS可以显着改善AD小鼠的认知和记忆功能损伤,降低Aβ引起的神经元凋亡和突触功能障碍。此外,COS治疗还可以重塑紊乱的肠道菌群,改善失衡的菌群代谢,修复受损的肠屏障,减轻外周慢性炎症。通过伪无菌小鼠和粪便菌群移植实验,我们发现COS或可以通过多种途径,整体协同改善AD小鼠的认知功能障碍。综上所述,本研究为将COS用于AD的治疗提供了一定的理论基础。
赵明[10]（2021）在《阿尔茨海默病关键基因筛选及龟龄集干预作用的研究》文中进行了进一步梳理阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease,AD）是一种进行性神经退行性疾病,发病率呈不断上升趋势,给患者家庭及人类社会带来了巨大的压力和挑战。现代医学对AD的治疗效果不佳,中医药对痴呆的认识历史悠久,中药复方以其多靶点、多途径、协同增效的特点,发挥对AD的整体治疗作用。龟龄集作为着名的补肾抗衰老名方,具有固补肾气、强身健脑等功效,探索其对AD的治疗作用和潜在作用机制,对中医药防治AD具有重要的意义。目的:评价龟龄集治疗AD的临床疗效,利用生物信息学分析方法探讨龟龄集治疗AD的可能机制,为龟龄集治疗AD的临床应用提供科学依据。方法:1临床研究:实行双盲、双模拟的随机对照试验,一共纳入AD（肾虚髓减证）患者60例,分为试验组和对照组。试验组给予龟龄集胶囊+银杏叶片模拟剂治疗,对照组给予银杏叶片+龟龄集胶囊模拟剂治疗,总疗程为24周。观察治疗前后患者的MMSE、ADAS-cog、ADL、中医证候评分变化情况及药物安全性。2生物信息学分析的筛选和验证:从GEO数据库获取AD患者基因芯片数据集,从样本来源为脑颞中回组织的GSE132903数据集中筛选差异基因,进一步对差异基因行WGCNA分析,以获取与AD显着相关的差异表达基因。运用DAVID数据库对与AD显着相关的DEGs行GO富集分析和KEGG通路富集分析。并通过STRING数据库构建蛋白相互作用网络,利用Cytoscape软件以提取关键基因。通过样本来源为血液组织的GSE63060数据集中的差异基因与从脑颞中回组织筛选出来的关键基因取交集,以此筛选出AD患者脑血协同表达的关键基因。取服用龟龄集的AD患者的血液样本与非AD对照组血液样本进行比较,验证AD患者血液中关键基因的表达情况,并检测龟龄集对这些关键基因表达情况的影响。结果:1临床研究结果:（1）主要疗效指标:与治疗前相比,治疗12周和治疗24周试验组和对照组MMSE总评分均明显升高,有统计学差异（P<0.01）;组间比较,治疗12周和治疗24周两组MMSE总评分无统计学差异（P>0.05）。与治疗前相比,治疗12周和治疗24周试验组和对照组ADAS-cog总评分均明显下降,有统计学差异（P<0.01）;组间比较,治疗12周和治疗24周两组ADAS-cog总评分无统计学差异（P>0.05）。（2）次要疗效指标:与治疗前比,治疗12周和治疗24周试验组和对照组中医证候评分量表总分均明显下降,有统计学差异（P<0.01）;组间比较,治疗12周和治疗24周两组中医证候评分量表总分无统计学差异（P>0.05）。与治疗前比,试验组和对照组ADL总积分均明显下降（P<0.01）;组间比较,治疗12周和治疗24周两组ADL总积分无统计学差异（P>0.05）。（3）安全性评价:两组患者在治疗期间均未出现不良反应,治疗期间两组患者血常规、尿常规、粪便常规、肝功能、肾功能、心电图均未见明显异常变化。2生物信息学分析结果:从GSE132903数据集中共筛选出755个DEGs。这些DEGs的WGCNA分析显示绿松石色模块聚集的364个DEGs与AD呈显着负相关。这364个与AD显着相关DEGs的GO富集分析显示,在生物学过程层面,与AD显着相关的DEGs主要涉及细胞器定位的建立、信号释放、突触组织等。在细胞学组件层面,DEGs主要涉及突触前、谷氨酸能突触、细胞前沿等。在分子功能层面,DEGs主要涉及钙调蛋白结合、通道调节器活动、离子通道调节剂活性等。KEGG通路分析显示,DEGs参与的生物通路主要涉及钙信号通路、cGMP-PKG信号通路、GABA能突触等。蛋白相互作用网络分析富集程度最高的前20个关键基因为:SYT1、ITSN1、AMPH、DNM3、CLTA、NECAP1、REPS2、GABRG2、GFAP、GABRA1、DNF、ITPR1、ITPR3、ATP2A2、PPP3CB、NRXN1、GAD1、SST、NPY、PPP3CA。AD患者脑血协同表达的关键基因为PPP3CB和ITPR3。3 RT-PCR验证及龟龄集干预后结果:与非AD对照组比,PPP3CB在AD患者血液中显着低表达（P<0.01）。非AD对照组和AD组之间的ITPR3在血液中的表达无统计学差异（P>0.05）。龟龄集干预后能显着上调AD组血液中PPP3CB的表达,有统计学差异（P<0.05）。结论:1临床研究结论:龟龄集可以增加轻中度AD（肾虚髓减证）患者的MMSE评分,降低ADAS-cog、ADL评分和中医证候评分,改善AD患者认知功能和日常生活能力。治疗期间无不良反应,安全性良好。2生信分析及RT-PCR验证结论:PPP3CB在AD患者血清中显着下调,龟龄集可显着上调AD患者中PPP3CB的表达,龟龄集可能通过调节PPP3CB而发挥对AD的治疗作用。
二、阿尔茨海默病的保护因素——运动和户外活动（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、阿尔茨海默病的保护因素——运动和户外活动（论文提纲范文）
（1）应重视早期阿尔茨海默病的非药物治疗（论文提纲范文）
| 一、运动锻炼 |
| 二、认知训练 |
| 三、生活方式干预 |
| 四、其他非药物治疗方法 |
| 五、小结 |
（2）阿尔茨海默病的预防理论与干预策略（NEWSTART）（论文提纲范文）
| 1 阿尔茨海默病的相关理论假说 |
| 1.1 老年大脑认知功能维持的双营养理论[3,4] |
| 1.2 阿尔茨海默病发生的长期信息刺激不足与风险叠加理论[3,4] |
| 1.2.1 儿童青少年期： |
| 1.2.2成年期： |
| 1.2.3 老年期 |
| 1.2.3. 1 个人信息剥夺 |
| 1.2.3. 2 家庭信息剥夺 |
| 1.2.3. 3 社会信息剥夺 |
| 1.3 阿尔茨海默病早期预防的多（元）靶点干预理论[3～5] |
| 2 阿尔茨海默病的预防策略 |
| 2.1 阿尔茨海默病的预防策略 |
| 2.1.1 提高意识 |
| 2.1.2 早期预防 |
| 2.1.3 三级干预 |
| 2.1.4 久久为功 |
| 2.2 阿尔茨海默病预防的指导技术要求 |
| 2.2.1 预防为主，重在意识。 |
| 2.2.2 经常锻炼，重在坚持。 |
| 2.2.3 社会活动，重在参与。 |
| 2.2.4 家庭支持，重在温暖。 |
| 2.2.5 均衡营养，重在全面。 |
| 2.2.6 读书学习，重在过程。 |
| 3 阿尔茨海默病早期预防的新起点（NEWSTART) |
| 3.1 营养(nutrition) |
| 3.2 锻炼[5,7～10](exercise) |
| 3.3 体重[5](weight) |
| 3.4 阳光(sunlight) |
| 3.5 训练[11,12](training) |
| 3.6 交往(associating) |
| 3.7 休息(rest) |
| 3.8 信念(trust) |
（4）色氨酸及代谢物抑制β-淀粉样蛋白聚集的分子动力学研究 ——对运动延缓阿尔茨海默病的机理初探（论文提纲范文）
| 主要英文缩略词表 (Abbreviations) |
| 摘要 |
| abstract |
| 1 绪论 |
| 1.1 研究背景 |
| 1.2 研究目的 |
| 1.3 研究意义 |
| 2 文献综述 |
| 2.1 阿尔茨海默病与β-淀粉样蛋白聚集的相关研究 |
| 2.1.1 阿尔茨海默病概述 |
| 2.1.2 β-淀粉样蛋白聚集概述 |
| 2.2 运动对阿尔茨海默病的延缓及其机制研究 |
| 2.2.1 运动延缓阿尔茨海默病的动物实验 |
| 2.2.2 运动延缓阿尔茨海默病的人体实验 |
| 2.2.3 运动影响β-淀粉样蛋白致病的机制探讨 |
| 2.3 运动影响色氨酸及代谢物的研究 |
| 2.3.1 运动影响色氨酸和血清素的人体实验 |
| 2.3.2 运动影响色氨酸和血清素的动物实验 |
| 2.3.3 运动时段对褪黑素的影响 |
| 2.4 抑制剂与β-淀粉样蛋白相互作用的相关研究 |
| 2.4.1 天然小分子抑制β-淀粉样蛋白聚集的相关研究 |
| 2.4.2 内源性小分子抑制β-淀粉样蛋白聚集的相关研究 |
| 2.4.3 色氨酸及代谢物抑制β-淀粉样蛋白聚集的相关研究 |
| 3 研究方案 |
| 4 研究方法 |
| 4.1 文献分析法 |
| 4.2 分子动力学方法 |
| 4.2.1 常规分子动力学模拟 |
| 4.2.2 副本交换分子动力学模拟 |
| 4.2.3 常用软件 |
| 4.2.4 分子力场 |
| 4.2.5 分子力场的相互作用项 |
| 4.2.6 小分子力场构建与结构处理 |
| 4.2.7 模拟细节 |
| 4.2.8 分析方法 |
| 5 研究内容 |
| 5.1 色氨酸抑制阿尔茨海默病β-淀粉样蛋白聚集、破坏β-淀粉样蛋白原纤维的分子机理研究 |
| 5.1.1 前言 |
| 5.1.2 材料与方法 |
| 5.1.3 结果与讨论 |
| 5.1.4 结论 |
| 5.2 血清素抑制阿尔茨海默病β-淀粉样蛋白聚集、破坏β-淀粉样蛋白原纤维的分子机理研究 |
| 5.2.1 前言 |
| 5.2.2 材料与方法 |
| 5.2.3 结果与讨论 |
| 5.2.4 结论 |
| 5.3 血清素/质子化血清素破坏β-淀粉样蛋白原纤维的分子机理研究 |
| 5.3.1 前言 |
| 5.3.2 材料与方法 |
| 5.3.3 结果与讨论 |
| 5.3.4 结论 |
| 5.4 褪黑素抑制阿尔茨海默病β-淀粉样蛋白聚集、破坏β-淀粉样蛋白原纤维的分子机理研究 |
| 5.4.1 前言 |
| 5.4.2 材料与方法 |
| 5.4.3 结果与讨论 |
| 5.4.4 结论 |
| 5.5 色氨酸/色氨酸+血清素破坏β-淀粉样蛋白原纤维的分子机理研究 |
| 5.5.1 前言 |
| 5.5.2 材料与方法 |
| 5.5.3 结果与讨论 |
| 5.5.4 结论 |
| 参考文献 |
| 6 总结与展望 |
| 6.1 总结 |
| 6.2 展望 |
| 致谢 |
| 个人简介 |
| 攻读学位期间的科研工作 |
（5）基于肾脑相关理论的温针灸治疗轻中度阿尔茨海默病临床研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 缩略词表 |
| 前言 |
| 临床研究 |
| 临床资料 |
| 研究方法 |
| 研究结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 不足与展望 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 附录 A:综述 针灸治疗阿尔茨海默病的研究进展 |
| 参考文献 |
| 附表 B |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（6）维生素D与老年人认知相关性及抗炎机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 常用缩写词中英文对照表 |
| 前言 |
| 第一部分 老年人认知情况与体内血浆VD及炎症因子水平的病例对照研究 |
| 1 对象与方法 |
| 1.1 研究对象 |
| 1.2 调查内容与方法 |
| 1.3 质量控制 |
| 1.4 统计分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 一般情况 |
| 2.2 不同认知组老年人Mo CA总分及各项得分比较 |
| 2.3 不同认知组老年人一般情况的比较 |
| 2.4 不同认知组间血浆VD水平的比较 |
| 2.5 不同认知组间炎症因子IL-1β、IL-18 水平的比较 |
| 2.6 老年人认知水平与VD水平及炎症因子的相关性 |
| 2.7 影响老年人认知障碍的多因素分析 |
| 2.8 logistic回归分析炎症因子IL-1β、IL-18 与认知的相关性 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 第二部分 老年认知障碍VD水平与炎症因子的相关性研究 |
| 1 对象与方法 |
| 1.1 研究对象及目的 |
| 1.2 调查内容与方法 |
| 1.3 统计分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 不同VD水平组认知障碍老年人一般情况的比较 |
| 2.2 不同VD水平组认知障碍老年人炎症因子IL-1β水平的比较 |
| 2.3 不同VD水平组认知障碍老年人炎症因子IL-18 水平的比较 |
| 2.4 认知障碍老年人VD水平与炎症因子IL-1β及IL-18 水平的相关性 |
| 2.5 炎症因子对认知障碍老年人VD水平的多因素logistic分析 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 第三部分 1,25(OH)_2D_3对Aβ_(1-42)诱导PC12 细胞焦亡的保护作用 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 细胞株 |
| 1.2 主要实验试剂 |
| 1.3 主要仪器和设备 |
| 1.4 主要溶液及其配制 |
| 1.5 实验方法 |
| 1.6 统计方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 Aβ_(1-42)以及1,25(OH)_2D_3对PC12 细胞存活率的影响 |
| 2.2 1,25(OH)_2D_3对Aβ_(1-42)诱导PC12 细胞存活率的影响 |
| 2.3 1,25(OH)_2D_3对Aβ_(1-42)诱导PC12 细胞膜通透性的影响 |
| 2.4 1,25(OH)_2D_3对Aβ_(1-42)诱导PC12 细胞LDH释放率的影响 |
| 2.5 1,25(OH)_2D_3对Aβ_(1-42)诱导PC12 细胞炎症因子IL-1β及IL-18 水平的影响 |
| 2.6 1,25(OH)_2D_3对Aβ_(1-42)诱导PC12 细胞焦亡通路相关蛋白的影响 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 第四部分 1,25(OH)_2D_3对Aβ_(1-42)诱导细胞焦亡机制研究 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 细胞株 |
| 1.2 主要实验试剂 |
| 1.3 主要仪器和设备 |
| 1.4 主要溶液及其配制 |
| 1.5 实验方法 |
| 1.6 统计方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 Caspase-1-si RNA对1,25(OH)_2D_3与Aβ_(1-42)诱导细胞焦亡通路相关蛋白的影响 |
| 2.2 Caspase-1-si RNA对1,25(OH)_2D_3与Aβ_(1-42)诱导细胞膜通透性的影响 |
| 2.3 Caspase-1-si RNA对1,25(OH)_2D_3与Aβ_(1-42)诱导细胞LDH释放率的影响 |
| 2.4 Caspase-1-si RNA对1,25(OH)_2D_3与Aβ_(1-42)诱导细胞炎症因子IL-1β、IL-18水平的影响 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 中国老年人维生素 D 摄入与认知障碍防治进展 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 个人简介 |
（7）七氟醚通过上调水通道蛋白4表达增加小鼠胶质淋巴系统功能的机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| abstract |
| 缩略词表 |
| 第1章 绪论 |
| 第2章 综述 |
| 2.1 围术期认知功能障碍的发展史 |
| 2.2 围术期神经认知障碍的病因 |
| 2.2.1 麻醉因素 |
| 2.2.2 外科炎症因素 |
| 2.2.3 易感人群 |
| 2.3 胶质淋巴系统概述 |
| 2.3.1 胶质淋巴系统与阿尔茨海默病 |
| 2.3.2 胶质淋巴系统与血管性痴呆 |
| 2.3.3 胶质淋巴系统与睡眠 |
| 2.3.4 胶质淋巴系统与其他神经系统疾病 |
| 2.4 立题依据 |
| 第3章 材料与方法 |
| 3.1 主要材料和设备 |
| 3.2 实验方法 |
| 3.2.1 实验动物和星形胶质细胞的准备 |
| 3.2.2 小脑延髓池注射 |
| 3.2.3 小鼠麻醉 |
| 3.2.4 行为学测试 |
| 3.2.5 伊文思蓝在脑内分布 |
| 3.2.6 脑免疫组化检测AQP4 表达 |
| 3.2.7 星形胶质细胞免疫荧光检测AQP4 蛋白表达 |
| 3.2.8 蛋白免疫印迹法检测AQP4和PKC |
| 3.2.9 星形胶质细胞总SOD活性检测 |
| 3.2.10 星形胶质细胞IL-6 检测 |
| 3.2.11 膜片钳技术检测星形胶质细胞的总钾通道电导性 |
| 3.2.12 统计学分析 |
| 第4章 结果 |
| 4.1 高浓度七氟醚对小鼠麻醉苏醒早期行为的影响 |
| 4.2 七氟醚增强胶质淋巴系统功能 |
| 4.3 七氟醚增加脑内AQP4 的表达 |
| 4.4 TGN-020 明显抑制胶质淋巴系统的功能 |
| 4.5 TGN-020 对小鼠行为学的影响 |
| 4.6 TGN-020 预处理后七氟醚对小鼠行为学的影响 |
| 4.7 TGN-020 预处理后七氟醚对胶质淋巴系统功能的影响 |
| 4.8 七氟醚麻醉状态下全脑NIRF成像结果 |
| 4.9 血清伊文思蓝的含量 |
| 4.10 TGN-020 预处理后七氟醚对脑AQP4 表达的影响 |
| 4.11 麻醉和手术对血清IL-6 表达的影响 |
| 4.12 七氟醚对星形胶质细胞AQP4 表达的影响 |
| 4.13 七氟醚对星形胶质细胞PKC表达的影响 |
| 4.14 七氟醚对星形胶质细胞IL-6 表达的影响 |
| 4.15 七氟醚对星形胶质细胞SOD的影响 |
| 4.16 七氟醚对星形胶质细胞总钾通道的影响 |
| 第5章 讨论 |
| 第6章 结论 |
| 创新点 |
| 参考文献 |
| 作者简介及在攻读博士期间所取得的科研成果 |
| 致谢 |
（8）解毒益智方对阿尔茨海默病双转基因小鼠行为学及大脑皮层内β-淀粉样蛋白沉积及BACE1表达影响的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩略语 |
| 引言 |
| 文献综述 |
| 综述一 AD的病因病机及治疗进展 |
| 1 中医学对痴呆的系统认识及研究进展 |
| 1.1 中医学对痴呆病名由来及发展的认识 |
| 1.2 中医学对痴呆病因病机的古代认识 |
| 1.3 中医学对痴呆辨证论治及相关研究的认识 |
| 1.4 中医学对痴呆治疗的古今认识 |
| 综述二 西医学对AD的发病机制及治疗进展研究 |
| 1 现代医学对AD的认识及研究进展 |
| 1.1 AD的概述及流行病学 |
| 1.2 现代医学对AD发病因素的认识及研究 |
| 1.3 现代医学对AD发病相关机制的认识 |
| 2 现代医学对AD治疗的认识 |
| 2.1 乙酰胆碱酯酶抑制剂(AchEIs) |
| 2.2 兴奋性氨基酸受体拮抗剂 |
| 2.3 甘露特纳胶囊 |
| 2.4 其他非药物治疗 |
| 3 问题与展望 |
| 综述三 Aβ在脑内异常沉积的机制 |
| 1.Aβ的产生、分布与清除、传递与运输的研究进展 |
| 1.1 Aβ的产生 |
| 2 Aβ的清除 |
| 2.1 细胞的清除作用 |
| 2.2 Aβ被降解酶的清除作用 |
| 2.3 中枢Aβ的清除途径 |
| 2.4 血液成分介导的Aβ清除 |
| 综述四 解毒益智方在阿尔茨海默病中的应用 |
| 1 解毒益智方的创立 |
| 1.1 脑髓理论 |
| 1.2 髓虚毒损 |
| 1.3 补肾益髓,活血化痰解毒法 |
| 2 解毒益智方通过调节SIRT1/AMPK通路抑制BACE1表达改善Aβ的沉积 |
| 3 解毒益智方对阿尔茨海默病的临床应用 |
| 实验研究 |
| 第一章 CCP对Aβ25-35诱导的PC12细胞损伤保护性的研究 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 第二章 JDYZF对APP/PS1双转基因小鼠行为学的研究 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 第三章 JDYZF对APP/PS1双转基因小鼠脑内Aβ水平变化的影响 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 第四章 JDYZF对APP/PS1双转基因小鼠脑内BACE1表达的影响 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 结论 |
| 本文创新点 |
| 参考文献 |
| 附录1 |
| 致谢 |
| 在学期间主要研究成果 |
| 个人简介 |
（9）壳寡糖对阿尔茨海默病的作用效果评价及其机制初探（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 第1章 引言 |
| 1.1 阿尔茨海默病概述 |
| 1.2 阿尔茨海默病的发病机制 |
| 1.2.1 Aβ级联假说 |
| 1.2.2 Tau蛋白假说 |
| 1.2.3 胆碱能假说 |
| 1.2.4 氧化应激假说 |
| 1.2.5 微生物感染性假说 |
| 1.2.6 微生物-肠-脑轴假说 |
| 1.3 阿尔茨海默病的治疗现状 |
| 1.3.1 胆碱酯酶抑制剂 |
| 1.3.2 NMDA受体拮抗剂 |
| 1.3.3 靶向Aβ的治疗 |
| 1.3.4 靶向tau蛋白的治疗 |
| 1.3.5 针对神经炎症的治疗 |
| 1.3.6 靶向肠脑轴的治疗 |
| 1.3.7 天然产物在AD治疗上的应用 |
| 1.4 壳寡糖概述 |
| 1.4.1 COS的制备和分离纯化 |
| 1.4.2 COS及其衍生物在神经保护中的潜在应用及机制 |
| 1.4.3 COS的吸收和代谢 |
| 1.5 立题依据和研究思路 |
| 1.5.1 立题依据 |
| 1.5.2 研究内容 |
| 1.5.3 技术路线 |
| 第2章 壳寡糖的血脑屏障透过性研究 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 实验材料和设备 |
| 2.2.1 实验材料 |
| 2.2.2 实验试剂 |
| 2.2.3 实验设备 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.3.1 COS的制备 |
| 2.3.2 微流控芯片的制造与组装 |
| 2.3.3 基于微流控芯片的血脑屏障微系统建立 |
| 2.3.4 Transwell血脑屏障模型构建 |
| 2.3.5 表观渗透率检测 |
| 2.3.6 免疫荧光染色 |
| 2.3.7 体外模型探究COS能否透过血脑屏障 |
| 2.3.8 COS的荧光标记 |
| 2.3.9 动物活体成像验证COS能否透过血脑屏障 |
| 2.4 实验结果 |
| 2.4.1 COS的脱乙酰度 |
| 2.4.2 COS的聚合度分布 |
| 2.4.3 Transwell血脑屏障模型 |
| 2.4.4 微流控芯片血脑屏障模型 |
| 2.4.5 动物活体成像 |
| 2.5 小结与讨论 |
| 第3章 壳寡糖通过影响Aβ聚集减轻其介导的神经毒性 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 实验材料和设备 |
| 3.2.1 实验材料 |
| 3.2.2 实验试剂 |
| 3.2.3 实验设备 |
| 3.3 实验方法 |
| 3.3.1 单一聚合度的壳寡糖的制备 |
| 3.3.2 Aβ42蛋白预处理 |
| 3.3.3 Aβ42样品制备 |
| 3.3.4 COS影响Aβ聚集的体系设置 |
| 3.3.5 ThT荧光实验 |
| 3.3.6 刚果红染色实验 |
| 3.3.7 圆二色光谱实验 |
| 3.3.8 透射电镜观察Aβ的聚集形态 |
| 3.3.9 微量热涌动仪检测COS与Aβ的互作 |
| 3.3.10 分子动力学模拟模型和参数 |
| 3.3.11 细胞培养 |
| 3.3.12 MTT检测细胞活力 |
| 3.3.13 细胞凋亡检测 |
| 3.3.14 氧化应激水平检测 |
| 3.3.15 细胞RNA提取 |
| 3.3.16 实时荧光定量PCR |
| 3.3.17 荧光染色定量分析方法 |
| 3.3.18 数据统计和分析 |
| 3.4 实验结果 |
| 3.4.1 COS对Aβ42的聚集抑制效果 |
| 3.4.2 COS对Aβ42纤维状聚体的分解作用 |
| 3.4.3 TEM观察COS对Aβ42聚集体形貌的影响 |
| 3.4.4 COS对Aβ42二级结构转化的影响 |
| 3.4.5 不同DP的COS对Aβ42二级结构转化的影响 |
| 3.4.6 不同DDA的COS对Aβ42二级结构转化的影响 |
| 3.4.7 COS与Aβ42的相互作用研究 |
| 3.4.8 不同DP的COS与Aβ42的相互作用 |
| 3.4.9 不同DDA的COS与Aβ42的相互作用 |
| 3.4.10 分子动力学模拟探究COS影响Aβ42聚集的分子机制 |
| 3.4.11 COS对Aβ42聚集引起的细胞毒性的影响 |
| 3.4.12 COS对Aβ42诱导产生的小胶质细胞功能紊乱的影响 |
| 3.5 小结与讨论 |
| 第4章 壳寡糖对AD模型小鼠认知功能的改善及其相关机制探究 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 实验材料和设备 |
| 4.2.1 实验材料 |
| 4.2.2 实验试剂 |
| 4.2.3 实验设备 |
| 4.3 实验方法 |
| 4.3.1 Aβ42寡聚体制备 |
| 4.3.2 AD小鼠模型构建 |
| 4.3.3 Morris水迷宫实验 |
| 4.3.4 旷场实验 |
| 4.3.5 新物体识别实验 |
| 4.3.6 抗生素混合剂处理获得伪无菌小鼠 |
| 4.3.7 粪便菌群移植 |
| 4.3.8 组织样品的采集与储存 |
| 4.3.9 血清中和脑组织匀浆中的炎症因子检测 |
| 4.3.10 免疫组织化学分析 |
| 4.3.11 免疫荧光染色 |
| 4.3.12 免疫荧光染色定量分析方法 |
| 4.3.13 结肠组织的RNA提取 |
| 4.3.14 实时荧光定量PCR |
| 4.3.15 16S rRNA V3和V4区扩增子测序 |
| 4.3.16 生物信息学分析 |
| 4.3.17 非靶代谢组分析 |
| 4.3.18 统计分析 |
| 4.4 实验结果 |
| 4.4.1 AD小鼠模型构建 |
| 4.4.2 COS对AD小鼠行为学的影响 |
| 4.4.3 COS对AD小鼠脑内反应性胶质细胞增生的影响 |
| 4.4.4 COS对AD小鼠海马区神经元的影响 |
| 4.4.5 COS对AD小鼠突触功能损伤的影响 |
| 4.4.6 COS对AD小鼠肠道屏障完整性的影响 |
| 4.4.7 COS对AD小鼠肠道炎症的影响 |
| 4.4.8 COS对AD小鼠肠道菌群多样性的影响 |
| 4.4.9 COS对AD小鼠肠道菌群物种组成的影响 |
| 4.4.10 COS对AD小鼠肠道菌群代谢产物的影响 |
| 4.4.11 肠道菌群在COS治疗中的作用 |
| 4.5 小结与讨论 |
| 第5章 结论与展望 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 研究结论 |
| 5.3 本论文创新点 |
| 5.4 工作展望 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 作者简历及攻读学位期间发表的学术论文与研究成果 |
（10）阿尔茨海默病关键基因筛选及龟龄集干预作用的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 文献综述 |
| 综述一 从五脏探讨阿尔茨海默病的中医治疗 |
| 1 古籍中有关AD的认识 |
| 2 人以五脏为本 |
| 3 阿尔茨海默病本虚于五脏 |
| 4 阿尔茨海默病标实与五脏的关系 |
| 5 小结 |
| 参考文献 |
| 综述二 生物信息学在阿尔茨海默病中的应用进展 |
| 1 阿尔茨海默病与基因组学 |
| 2 阿尔茨海默病与蛋白质组学 |
| 3 阿尔茨海默病与代谢组学 |
| 4 阿尔茨海默病与药物靶点预测 |
| 5 小结 |
| 参考文献 |
| 第一章 临床研究 |
| 前言 |
| 第一节 研究对象与方法 |
| 1 研究对象 |
| 2 病例选择 |
| 3 试验方法 |
| 第二节 临床研究结果 |
| 1 纳入病例情况 |
| 2 基线资料分析 |
| 3 治疗后疗效比较 |
| 4 安全性评价 |
| 第三节 讨论 |
| 参考文献 |
| 第二章 AD关键基因筛选验证及龟龄集干预作用 |
| 第一节 材料与方法 |
| 1 筛选AD关键基因 |
| 2 RT-PCR检测目的基因表达 |
| 3 技术路线 |
| 第二节 研究结果 |
| 1 AD差异表达基因的筛选 |
| 2 DEGs的WGCNA分析 |
| 3 DEGs的GO分析和KEGG分析 |
| 4 PPI网络构建及关键基因筛选 |
| 5 AD脑-血共表达关键基因 |
| 6 关键基因在验证数据集中的表达情况 |
| 7 关键基因的疾病预测能力 |
| 8 PCR检测关键基因 |
| 9 PCR检测龟龄集干预前后关键基因的表达情况 |
| 第三节 讨论 |
| 参考文献 |
| 结语 |
| 致谢 |
| 附录 |
| 个人简历 |
四、阿尔茨海默病的保护因素——运动和户外活动（论文参考文献）
- [1]应重视早期阿尔茨海默病的非药物治疗[J]. 陈生弟,方嵘. 中国现代神经疾病杂志, 2021(11)
- [2]阿尔茨海默病的预防理论与干预策略（NEWSTART）[J]. 徐勇,林璐,谭琪,李静,凌睿哲. 阿尔茨海默病及相关病杂志, 2021(03)
- [3]“五感疗法”在阿尔兹海默症老年人小组活动中的运用研究 ——以S市LW社区为例[D]. 胡京京. 安徽大学, 2021
- [4]色氨酸及代谢物抑制β-淀粉样蛋白聚集的分子动力学研究 ——对运动延缓阿尔茨海默病的机理初探[D]. 弓烨弘. 上海体育学院, 2021(09)
- [5]基于肾脑相关理论的温针灸治疗轻中度阿尔茨海默病临床研究[D]. 马慧慧. 山西中医药大学, 2021(09)
- [6]维生素D与老年人认知相关性及抗炎机制研究[D]. 成乐. 山西医科大学, 2021
- [7]七氟醚通过上调水通道蛋白4表达增加小鼠胶质淋巴系统功能的机制研究[D]. 任许利. 吉林大学, 2021(01)
- [8]解毒益智方对阿尔茨海默病双转基因小鼠行为学及大脑皮层内β-淀粉样蛋白沉积及BACE1表达影响的研究[D]. 朱晓婷. 长春中医药大学, 2021(01)
- [9]壳寡糖对阿尔茨海默病的作用效果评价及其机制初探[D]. 朱立猛. 中国科学院大学(中国科学院过程工程研究所), 2021(01)
- [10]阿尔茨海默病关键基因筛选及龟龄集干预作用的研究[D]. 赵明. 北京中医药大学, 2021(08)