流感病毒检测方法综述

流感病毒检测方法综述

问:禽流感病毒和抗体的实验室检测方法分别有哪些?各种方法用途分别是什么?
  1. 答:病毒检测方法有:
    (1)病毒(鸡胚、细胞)分离培养与鉴定,用途为直接分离病毒;
    (2)免疫荧光法,用途为检测组织、细胞培养物中病毒抗原;
    (3)免疫酶法(包括免疫酶组织化学染色法和免疫过氧化物酶细胞单层试验),用途为检测组织、细胞培养物中病毒抗原;
    (4)中和试验,用已知阳性血清检测病毒,金标准方法
    (5)血凝/血凝抑制试验,用已知阳性血清检测病毒
    (6)乳胶凝集试验,用已知阳性血清检测病毒抗巧芹原
    (7)胶体金试纸,用已知阳性血清检测病毒抗原
    (8)ELISA方法,用已知阳性血清检测病毒抗原
    (9)RT-PCR(含荧光RT-PCR),用途为检测病毒核酸
    (10)NASBA,用途为检测病毒核酸
    (11)核酸探针,用途为检测病毒核酸
    (12)基因芯片,检测病毒核酸
    (13)核酸序列测定,解析病毒核酸
    抗体检测方法
    (1)琼脂扩散试验,检测病毒NP和M蛋白抗体
    (2)血凝抑制试验,检测病毒HA蛋白抗体,可用于免疫效果评估
    (3)神经氨橘宽带酸酶抑制试验,检测病毒NA蛋白抗体
    (4)中和试验,用已知病毒检测血圆芦清,金标准方法
    (5)ELISA方法,用已知病毒抗原检测特异抗体
    (6)胶体金试纸,用已知病毒抗原检测特异抗体
    (7)乳胶凝集试验,用已知病毒抗原检测特异抗体
问:禽流感怎么检查
  1. 答:检查方法
    1.外周血象及骨髓象
    白细胞总数一般不高或降低,血小板正常。重症患者多有白细胞总数及淋巴细胞下降。骨髓细胞学检查显示细胞增生活跃,反应性组织细胞增生伴出血性吞噬现象。
    2.病毒抗原及基因检测
    取患者呼吸道标本,采用免疫荧光法(或酶联免疫法)检测甲型流感病毒核蛋白抗原(NP)及禽流感病毒H亚型抗原。还可用RT-PCR法检测禽流感病毒亚型特异性H抗原基因。最近Lau等用一种依赖核酸序列扩增技术(NASBA)对H5及H7进行快速检测,具有很高的敏感性和特异性,并能在一定程度上区分致病和非致病性禽流感病毒。
    3.病毒分离
    从患者呼吸道标本(如鼻咽分泌物、口腔含漱液、气管吸出物或呼吸道上皮细胞)中分离禽流感病毒。
    4.血清学检查 采集发病初期和恢复期双份血清,用血凝抑制试验、补体结合试验或酶联免疫吸附试验检测抗禽流感病毒抗体蔽慧,如前后滴度有4倍或以上迹坦升高,可作为回顾性诊断的参考指标。
    其他辅助检查:
    重症患者胸部X线检查可显示单宏州答侧或双侧肺炎,少数患者伴胸腔积液。
问:流行性感冒的诊断
  1. 答:根据病因、临床表现及实验室检查即可做出诊断。病原学相关检查:主要包括病毒团闷分离、病毒抗原、核酸和抗体检测。病毒分离为实验室检测的“金标准”;病毒的抗原和核酸检测可以用于早期诊断;抗体检测可以用于回顾性调查,但对病例的早期诊断意义不大。1.病毒核酸检测以RT-PCR(最好采用real-time RT-PCR)法检测呼吸道标本(咽拭子、鼻拭子、鼻咽或气管抽取物、痰)中的流感病毒核酸。病毒核酸检测的特异性和敏感性最好,且能快速区分病毒类型和亚型,一般能在4-6小时内获得结果。2.病毒分离培养从呼吸道标本中分离出流感病毒。在流感流行季节,流感样病例快速抗原诊断和免疫荧光法检测阴性的患者建议也作病毒分离。3.病毒抗原检测(快速诊断试剂检塌正弯测)快速抗原检测方法可采用免疫荧光的方法,检测呼吸道标本(咽拭子、鼻拭子、鼻咽或气管抽取物中的黏膜上皮细胞),使用单克隆抗体来区分甲、乙型流感,一般可在数小时以内获得结果。其他还有胶体金试验,一般能在10~30 分钟获得结果。对快速检测结果的解释应结合患者的流行病史和临床症状综合考虑:在非流行期,阳性筛查结清纤果有可能是假阳性;在流行期,阴性的筛选检测结果可能是假阴性;这两种情况均应考虑使用RT-PCR或病毒分离培养作进一步确认。4.血清学诊断检测流感病毒特异性IgM和IgG抗体水平。动态检测的IgG抗体水平恢复期比急性期有4倍或以上升高有回顾性诊断意义。
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