一、(R)-沙丁胺醇的合成研究进展（论文文献综述）
孙铭雪[1]（2021）在《表面等离子体共振直接法快速检测牛尿中克伦特罗和沙丁胺醇》文中研究指明克伦特罗（Clenbuterol,CLB）和沙丁胺醇（Salbutamol,SAL）属于β2-肾上腺受体激动剂,通常被称作“营养重分配剂”或是“瘦肉精”,因其具有营养再分配、改变动物体内物质的代谢途径,加速蛋白质的合成,显着提高食品动物的生长速度等生理作用,经常被非法用作饲料添加剂用于畜产品养殖业中来谋取利益。当动物体内残留的β2-受体激动剂通过食物链进入人体后,会对食用者产生一定的毒副作用,导致中毒现象。目前,我国和欧盟等许多国家已颁布了多部法律法规明确规定不允许将β2-受体激动剂作为动物饲料添加剂。因此,为加强食品安全监管,保障广大消费者的生命安全和利益,急需在现有的方法上建立更加快速、可靠的β2-受体激动剂检测方法。现有的确证检测方法有色谱法、常规酶联免疫法等,但其因前处理麻烦、操作复杂、检测时间较长等原因,无法实现实际样品的高通量检测。如今,由于具有灵敏度高、干扰小、检测速度快等优点,表面等离子体传感器在β2-受体激动剂的检测中具有重要的应用前景。本研究以克伦特罗和沙丁胺醇为检测目标物,首先制备了CLB和SAL单克隆抗体。将CLB-BSA和SAL-OVA作为实验中所需要使用的免疫原,取6-8周龄的雌性BALB/c小鼠,用选取的免疫原首先对小鼠进行免疫。对免疫后的小鼠进行血清效价检测,检测结果最好的小鼠说明其免疫效果最好,选取免疫效果最好的小鼠,脱颈处死后取其脾细胞,将脾细胞和复苏后的骨髓瘤细胞融合在一起,经间接ELISA法挑选出阳性细胞,再对连续三次检测呈阳性的细胞进行亚克隆,得到高效价、具有特异性且能稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株。采用诱生腹水法进行腹水制备,将杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔内产生腹水的方法收集抗体。对单抗的性质进行鉴定,得到CLB单克隆抗体腹水效价为1:4.50×106,SAL单克隆抗体效价为1:3.40×105;使用间接竞争ELISA法对两种单克隆抗体的特异性鉴定结果显示,CLB单抗对克伦特罗的IC50为2 ng/m L,对莱克多巴胺和沙丁胺醇等药物的IC50均大于10000,交叉反应率小于0.2%,SAL单抗对沙丁胺醇的IC50为2.5 ng/m L,在对其他几种药物的检测中发现,此抗体对克伦特罗的IC50为11.3 ng/m L,计算得二者的交叉反应率为22%,而对其他药物的交叉反应率仍小于0.2%。本研究建立了直接检测牛尿中克伦特罗和沙丁胺醇的SPR免疫传感器法。以氨基偶联法修饰CM7芯片,将抗体固定在芯片上,优化抗体偶联条件,以10 m M p H 5.0醋酸-醋酸钠缓冲液为耦合缓冲剂,EDC和NHS以1:1的比例混合活化芯片,活化时间为15 min,抗体反应时间为20 min,用乙醇胺溶液封闭芯片,封闭时间为15 min。采用直接检测法,将牛尿离心、过膜处理后,流过固定了抗体的CM7芯片来构建标准曲线,进行检测。经方法学验证,克伦特罗的标准曲线的线性范围在0.1～6 ng/m L之间,得到的最低检测限（LOD）为0.05 ng/m L。在1 ng/m L～5 ng/m L添加浓度范围内,牛尿中克伦特罗的平均回收率为82.46%～98.60%,批内变异系数为1.67%～8.50%,批间变异系数为2.61%～10.14%。以相同的方法对沙丁胺醇进行测定,在0.1～6 ng/m L浓度范围内呈现良好的线性关系,LOD为0.01 ng/m L,在1 ng/m L～5 ng/m L添加浓度范围内,牛尿中沙丁胺醇的平均回收率为87.82%～91.67%,批内变异系数为1.51%～2.67%,批间变异系数为2.67%～5.53%。采用UPLC-MS/MS法和SPR生物传感器法对牛尿样品中CLB和SAL的含量进行对比,结果表明SPR方法可用于动物中克伦特罗和沙丁胺醇的检测。
王昱堃[2]（2021）在《左旋R-沙丁胺醇凝胶剂的制备与银屑病治疗效果的验证》文中研究表明银屑病（俗称牛皮癣）是一种多因素共同导致的慢性自身免疫性疾病,其具体临床表现以红斑、鳞片等特征为主,主要症状出现于患者头皮和四肢延伸处。银屑病在全世界的发病率约为2%,每年都会有新的数以十万计的银屑病患者出现。难以忍受的症状和反复的病情对患者的生理和心理造成巨大压力。目前上市的银屑病治疗药物多以化学药物和生物药物为主,药物的副作用和其经济性难以满足银屑病患者个体的需求。沙丁胺醇作为一种速效的β2肾上腺素受体激动剂,在治疗哮喘等呼吸道炎症疾病中的应用十分广泛。沙丁胺醇有手性结构,研究表明它的左旋体的药理作用是其右旋体的数千倍,其左旋体在体内的吸收速率相对于消旋体较快,其右旋体具有一定毒理作用。本文首次将左旋R-沙丁胺醇应用于银屑病治疗的外用制剂中,开发了左旋R-沙丁胺醇凝胶剂的成型工艺,并对所制凝胶剂进行质量标准和药效的初步评价。本课题主要研究内容及结果如下:1、左旋R-沙丁胺醇凝胶剂成型工艺的研究采用单因素设计实验对左旋R-沙丁胺醇凝胶剂基质种类进行筛选,再通过凝胶基质材料用量和保湿剂用量,考察制备的左旋R-沙丁胺醇凝胶剂外观性状和稳定性,优化配方比例。最终确定左旋R-沙丁胺醇凝胶剂基本配方为:35%的2%卡波姆U2020,10%的1,2-丙二醇,0.5%的左旋R-沙丁胺醇,54.5%的水,p H为6.0±0.2,同时验证成型工艺简便可行。2、左旋R-沙丁胺醇凝胶剂的质量标准及稳定性研究确定凝胶剂的配方及成型工艺后,采用HPLC法,建立了左旋R-沙丁胺醇凝胶剂右旋体、含量、有关物质检测的方法,并对检测方法进行验证;考察左旋R-沙丁胺醇凝胶剂的影响因素稳定性,在高温和强光条件下放置30天,凝胶剂部分指标出现下降,说明该左旋R-沙丁胺醇凝胶剂需要采用避光的外包装,在4℃条件下存放,以满足可用于下一步实验的要求。3、左旋R-沙丁胺醇凝胶剂的药效研究通过构建IMQ诱导小鼠银屑病样动物模型,来探究左旋R-沙丁胺醇凝胶剂对于银屑病的治疗效果。从形态学研究和组织学研究结果显示,左旋R-沙丁胺醇凝胶剂可改善小鼠背部皮损情况,降低PASI和Baker评分;小鼠全身评价结果显示,左旋R-沙丁胺醇凝胶剂可调节脾脏炎症免疫细胞的产生来抑制小鼠脾脏细胞的增殖,降低脾指数,证明左旋R-沙丁胺醇凝胶剂对银屑病的治疗作用。
张影[3]（2021）在《β2-AR/ERK1/2通路调控胃癌细胞EMT和迁移、侵袭作用的研究》文中指出胃癌（Gastric cancer,GC）是严重威胁人类生命健康的恶性肿瘤之一。据最新报道,其发病率和死亡率均排在我国第三位。近几年的研究结果显示,慢性应激会促进恶性肿瘤的发生发展。当恶性肿瘤患者处于慢性应激时,儿茶酚胺激素过量表达会导致肿瘤细胞侵袭性增强。研究指出,在其中发挥作用的关键靶点是β2-肾上腺素能受体（β2-adrenergic receptor;β2-AR）,β2-AR的高表达促进了多种肿瘤的恶性进展。大量研究也指出,β2-AR可以通过调控多种恶性肿瘤细胞的上皮-间质转化（Epithelial-to-mesenchymal transition,EMT）增强肿瘤细胞侵袭能力。EMT参与机体多种生理和病理过程,EMT的发生使细胞与细胞间黏附能力降低,赋予细胞较强的间质细胞特性进而促进肿瘤的恶性进展。调控EMT发生的信号通路错综复杂,细胞外信号调节激酶1/2（extracellular signal-regulated kinase1/2,ERK1/2）通过磷酸化转变为p-ERK1/2由细胞质进入细胞核发挥生物学作用。大量研究表明,ERK1/2可介导多种恶性肿瘤的EMT过程,进而参与细胞黏附和迁移在内的多种调控,通过阻断ERK1/2磷酸化发生能够有效遏制肿瘤的恶性发展。到目前为止,大多数针对β2-AR的细胞水平研究多用儿茶酚胺类激素如肾上腺素、去甲肾上腺素和人工合成的异丙肾上腺素进行实验,但它们均属非特异性激活β2-AR激动剂,因而本研究将用选择性β2-AR激动剂沙丁胺醇进行实验探究,更能明确β2-AR在调控胃癌细胞EMT和迁移、侵袭过程中的重要作用。本课题组前期实验结果表明,β2-AR可以通过促进胃癌肿瘤血管的生成进而加速胃癌的恶性进展,但其介导胃癌细胞EMT和迁移、侵袭能力的分子机制尚不明确。因此,本次研究利用选择性β2-AR激动剂沙丁胺醇和β2-AR拮抗剂来探究β2-AR是否调控胃癌MGC-803细胞的迁移和侵袭,进一步利用ERK1/2磷酸化抑制剂PD98059,探讨β2-AR是否经ERK1/2调控胃癌MGC-803细胞EMT和迁移、侵袭能力。第一部分β2-AR对胃癌细胞迁移和侵袭能力的影响目的:探究选择性β2-AR激动剂沙丁胺醇和β2-AR拮抗剂ICI118,551（以下简称ICI）对胃癌细胞迁移和侵袭能力的影响。方法:1.利用CCK8法检测沙丁胺醇对胃癌MGC-803细胞的半数抑制浓度(IC50),筛选对细胞增殖无明显抑制作用的沙丁胺醇浓度。2.CCK8法检测沙丁胺醇和/或ICI对胃癌MGC-803细胞增殖的影响。3.Transwell方法检测对照组、沙丁胺醇组、ICI组和沙丁胺醇+ICI组胃癌MGC-803细胞的迁移能力和侵袭能力。结果:1.结果表明,随着沙丁胺醇作用时间增加,MGC-803细胞的存活能力降低,12h、24h、36h和48h的IC50分别为133.73±18.89μmol/L、70.38±11.35μmol/L、44.00±2.20μmol/L和31.77±2.19μmol/L。结合IC50值,选用16μmol/L浓度的沙丁胺醇作用24h,其对胃癌细胞的增殖无明显影响。2.四组间胃癌MGC-803细胞存活率差异无统计学意义（P>0.05）。3.与对照组相比,沙丁胺醇组迁移和侵袭能力显着增强（P<0.05）,ICI组迁移和侵袭能力显着减弱（P<0.05）,沙丁胺醇+ICI组迁移和侵袭能力显着减弱（P<0.05）;与沙丁胺醇组相比,沙丁胺醇+ICI组迁移和侵袭能力显着减弱（P<0.05）;与ICI组相比,迁移和侵袭能力显着增强（P<0.05）。结论:选择性β2-AR激动剂沙丁胺醇可以显着增强MGC-803细胞的迁移、侵袭能力;β2-AR拮抗剂ICI118,551可以显着降低MGC-803细胞的迁移、侵袭能力。综上,β2-AR可以调控胃癌细胞的迁移和侵袭能力。第二部分β2-AR/ERK1/2通路调控胃癌细胞EMT和迁移、侵袭能力。目的:利用ERK1/2磷酸化抑制剂PD98059,结合β2-AR激动剂沙丁胺醇和β2-AR拮抗剂ICI,探讨β2-AR调控胃癌MGC-803细胞EMT和迁移、侵袭能力的分子机制。方法:采用Western Blot法检测对照组、沙丁胺醇组、ICI组和沙丁胺醇+ICI组以及对照组、沙丁胺醇组、PD98059（以下简称PD）组和沙丁胺醇+PD组胃癌MGC-803细胞中β2-AR、ERK1/2、p-ERK1/2、p-ERK/ERK、E-Cadherin、N-Cadherin和snail蛋白的表达;qRT-PCR法检测对照组、沙丁胺醇组、ICI组和沙丁胺醇+ICI组以及对照组、沙丁胺醇组、PD组和沙丁胺醇+PD组MGC-803细胞中β2-AR、ERK1/2、CDH1（E-Cadherin基因名称）、CDH2（N-Cadherin基因名称）和snail mRNA的表达;Transwell方法检测对照组、沙丁胺醇组、PD组和沙丁胺醇+PD组胃癌MGC-803细胞的迁移能力和侵袭能力。结果:1 Western-Blot结果1.1β2-AR,ERK1/2,p-ERK1/2,p-ERK/ERK,E-Cadherin,N-Cadherin和snail蛋白在对照组、沙丁胺醇组、ICI组和沙丁胺醇+ICI组MGC-803细胞中的表达变化:四组间ERK1/2蛋白表达差异无统计学意义（P>0.05）。与对照组相比,沙丁胺醇组细胞中β2-AR、p-ERK1/2、p-ERK/ERK、N-Cadherin和snail蛋白表达显着升高（P<0.05）,E-Cadherin蛋白表达显着降低（P<0.05）;ICI组细胞中β2-AR、p-ERK1/2、p-ERK/ERK、N-Cadherin和snail蛋白表达显着降低（P<0.05）,E-Cadherin蛋白表达显着升高（P<0.05）;沙丁胺醇+ICI组细胞中β2-AR、p-ERK1/2、p-ERK/ERK、N-Cadherin和snail蛋白表达均显着降低（P<0.05）,E-Cadherin蛋白表达显着升高（P<0.05）。与沙丁胺醇组相比,沙丁胺醇+ICI组细胞中β2-AR、p-ERK、p-ERK/ERK、N-Cadherin和snail蛋白表达显着降低P<0.05),E-Cadherin蛋白表达显着升高（P<0.05）;与ICI组相比,沙丁胺醇+ICI组细胞中β2-AR、p-ERK、p-ERK/ERK、N-Cadherin和snail蛋白表达显着升高（P<0.05）,E-Cadherin蛋白表达显着降低（P<0.05）。1.2β2-AR,ERK1/2,p-ERK1/2,p-ERK/ERK,E-Cadherin,N-Cadherin和snail蛋白在对照组、沙丁胺醇组、PD组和沙丁胺醇+PD组MGC-803细胞中的表达变化:四组间ERK1/2表达差异无统计学意义（P>0.05）。与对照组相比,沙丁胺醇组细胞中β2-AR、p-ERK1/2、p-ERK/ERK、N-Cadherin和snail蛋白表达显着升高（P<0.05）,E-Cadherin蛋白表达显着降低（P<0.05）;PD组细胞中β2-AR蛋白的表达差异无统计学意义（P>0.05）,p-ERK1/2、p-ERK/ERK、N-Cadherin和snail蛋白表达显着降低（P<0.05）,E-Cadherin蛋白表达显着升高（P<0.05）;沙丁胺醇+PD组细胞中β2-AR蛋白表达显着升高（P<0.05）,p-ERK1/2、p-ERK/ERK和snail蛋白表达显着降低（P<0.05）,E-Cadherin、N-Cadherin蛋白表达差异无统计学意义（P>0.05）。与沙丁胺醇组相比,沙丁胺醇+PD组细胞中β2-AR蛋白表达差异无统计学意义（P>0.05）,E-Cadherin蛋白表达显着升高（P<0.05）,p-ERK1/2、p-ERK/ERK、N-Cadherin和snail表达显着降低（P<0.05）。与PD组相比,沙丁胺醇+PD组细胞中β2-AR、p-ERK1/2、p-ERK/ERK、N-Cadherin和snail蛋白表达显着升高（P<0.05）,E-Cadherin蛋白表达显着降低（P<0.05）。2 qRT-PCR结果2.1β2-AR,ERK1/2,CDH1,CDH2和snail mRNA在对照组、沙丁胺醇组、ICI组和沙丁胺醇+ICI组MGC-803细胞中的表达水平:与对照组相比,沙丁胺醇组β2-AR、ERK1/2、CDH2和snail mRNA表达显着升高（P<0.05）,CDH1 mRNA表达显着降低（P<0.05）;ICI组β2-AR、ERK1/2、CDH2和snail mRNA表达显着降低（P<0.05）,CDH1 mRNA表达显着升高（P<0.05）;沙丁胺醇+ICI组细胞中β2-AR、ERK1/2、CDH2和snail mRNA的表达均显着降低（P<0.05）,CDH1mRNA表达显着升高（P<0.05）。与沙丁胺醇组相比,沙丁胺醇+ICI组细胞中β2-AR、ERK1/2、CDH2和snail mRNA表达显着降低（P<0.05）,CDH1 mRNA表达显着升高（P<0.05）。与ICI组相比,沙丁胺醇+ICI组细胞中β2-AR、ERK1/2、CDH2和snail mRNA表达显着升高（P<0.05）,CDH1 mRNA表达显着降低（P<0.05）。2.2β2-AR,ERK1/2,CDH1,CDH2和snail mRNA在对照组、沙丁胺醇组、沙丁胺醇+PD组和PD组MGC-803细胞中的表达水平:与对照组相比,沙丁胺醇组β2-AR、ERK1/2、CDH2和snail mRNA表达显着升高（P<0.05）,CDH1 mRNA表达显着降低（P<0.05）;PD组细胞中β2-AR mRNA表达差异无统计学意义（P>0.05）,ERK1/2、CDH2和snail mRNA表达显着降低（P<0.05）,CDH1 mRNA的表达显着升高（P<0.05）;沙丁胺醇+PD组细胞中β2-AR mRNA的表达显着升高（P<0.05）,ERK1/2和snail mRNA表达显着降低（P<0.05）,CDH1和CDH2mRNA表达差异无统计学意义（P>0.05）。与沙丁胺醇组相比,沙丁胺醇+PD组细胞中β2-AR mRNA表达差异无统计学意义（P>0.05）,ERK1/2、CDH2和snail mRNA表达显着降低（P<0.05）,CDH1 mRNA表达显着升高（P<0.05）。与PD组相比,沙丁胺醇+PD组细胞中β2-AR、ERK1/2、CDH2和snail mRNA表达显着升高（P<0.05）,CDH1 mRNA表达显着降低（P<0.05）。3 Transwell实验结果与对照组相比,沙丁胺醇组迁移和侵袭能力显着增强（P<0.05）,PD组迁移和侵袭能力显着减弱（P<0.05）,沙丁胺醇+PD组迁移和侵袭能力显着减弱（P<0.05）;与沙丁胺醇组相比,沙丁胺醇+PD组迁移和侵袭能力显着减弱（P<0.05）;与PD组相比,沙丁胺醇+PD组迁移和侵袭能力显着增强（P<0.05）。结论:β2-AR/ERK1/2通路可调控胃癌细胞的EMT和迁移、侵袭能力。
张睿[4]（2020）在《(R)-左旋沙丁胺醇经鼻给药在大鼠帕金森疾病模型的治疗作用》文中提出帕金森病疾病PD为中枢神经性系统疾病。其发病机制及原因较多,主要为其多巴胺能神经元受损,从而造成多巴胺分泌减少。其临床症状主要表现为运动功能减退严重,如行走困难并伴有四肢僵直及肌肉震颤,且有反应迟缓、站立不稳等。其病理学特征主要为一种黑质中路易小体的形成。帕金森病的病因尚不清楚,其致病因素复杂,与环境,有毒物质接触,遗传因素,外部创伤及线粒体功能障碍等有关。到目前为止,帕金森的治疗手段较少,主要以口服左旋多巴药物为主。然而,这种疗法长期使用效果将大幅降低,副作用也较大。2017年Mittal等研究人员发现β2受体激动剂可调节α-突出核蛋白,进而抑制路易小体的产生。基于此发现,本团队初步探究了沙丁胺醇优映体左旋沙丁胺醇鼻滴剂用于治疗帕金森疾病的可能性。主要内容及结果如下:1.建立左旋沙丁胺醇鼻滴剂有关物质及含量高效液相色谱方法,并验证其相关指标:专属性、定量限及检测限、耐用性、线性、回收率等。随后配制左旋沙丁胺醇滴鼻剂并对其进行有关物质及含量的考察。结果均表明两种方法可以准确测量左旋沙丁胺醇鼻滴剂的有关物质及含量,且新配制的三批左旋沙丁胺醇滴鼻剂处方的有关物质及含量检测结果均符合制定的标准。2.使用了新型质谱成像技术DESI-MS研究了经鼻腔和静脉给药的大鼠脑中（R）-沙丁胺醇的空间分布图。鼻腔给药左旋沙丁胺醇的脑部递送效率明显高于静脉注射组。此外,实验表明,DESI-MS是比较和分析不同给药途径给药效果的有效工具。3.本研究所用鱼藤酮诱导的大鼠帕金森模型较为可行,造模组与不造模组有明显的行为学差异,且造模成功的大鼠运动障碍症状基本模拟了帕金森临床特征。运用网格、悬挂、跨步、旷场及斜板实验考察大鼠行为学运动能力。左旋沙丁胺醇表现出对造模成功大鼠的治疗作用,使其运动能力得到改善。此外,鼻腔给药左旋沙丁胺醇的给药途径要优于雾化给药。4.采用免疫组化法分析GFAP、TH及α-Synuclein表达,从病理学角度判断左旋沙丁胺醇对帕金森的潜在治疗作用。并且除了证实沙丁胺醇可以影响α-突触核蛋白（α-Synuclein）的表达来治疗帕金森疾病以外,还发现了其对GFAP和TH的抑制和促进作用。5.通过细胞毒性、蟾蜍粘膜毒性及心率实验,发现左旋沙丁胺醇在3个实验方面皆没有毒性,右旋沙丁胺醇在细胞毒性实验结果表明其具有一定的毒性,但在蟾蜍粘膜实验方面则没有表现出毒性。综上所述,左旋沙丁胺醇鼻腔给药相比于静脉注射及雾化给药,具有更好的脑部靶向效率,以及更好的治疗效果。行为学及病理学结果说明左旋沙丁胺醇鼻滴剂对鱼藤酮诱导的大鼠帕金森模型具有治疗作用。细胞、粘膜及心率毒性实验表明,左旋沙丁胺醇鼻滴剂的毒性及刺激性较低。
刘越[5]（2020）在《沙丁胺醇上转换标记磁分离荧光免疫检测方法研究》文中进行了进一步梳理沙丁胺醇（SAL）属于β2受体激动剂,是“瘦肉精”即克伦特罗的替代物质,对人体健康存在着很大的危害,尽管已经被禁止使用,但由于利益驱使,仍有一些不法分子非法使用,进而造成食品安全问题。本论文以沙丁胺醇为检测目标物,采用发绿色荧光的NaYF4:Yb,Er上转换纳米材料作为荧光信号标记物,同时结合免疫分析方法建立一种高灵敏检测动物源性食品中沙丁胺醇的快速荧光免疫检测方法。采用热分解法合成油溶性上转换纳米材料（OA-UCNPs）（激发波长为980 nm,发射波长为550 nm）,经配体交换法将聚丙烯酸（PAA）修饰到材料表面,使之转变为表面富含羧基的水溶性上转换纳米材料（PAA-UCNPs）,将其与抗体偶联制备信号探针。将羧基化的磁性聚苯乙烯微球（MPMs）与SAL包被原偶联制备感应探针,通过优化实验条件,最终确定信号探针添加量为50 μL,感应探针添加量为40 μL,样品添加量为50 μL,孵育时间为30 min,该方法的检测限为2× 10-4 μg L-1,线性范围为0.001～50 μg L-1（R2=0.9922）。牛肉、羊肉、猪肉和鸡肉样品经提取后,将提取液进行稀释后就可以进行检测,样品中SAL的定量限为0.05μg kg-1,样品的添加回收率在83.53%～107.94%之间。HPLC-MS/MS方法和商业化ELISA试剂盒方法被应用去比较和验证本方法的准确性。应用HPLC-MS/MS方法,样品添加回收率在91.79%～109.38%之间,应用商业化ELISA试剂盒,样品添加回收率在77.49%～114.92%之间,本文建立的方法的检测结果与仪器检测方法和商业化试剂盒方法的检测结果具有很好的一致性,说明本方法具有良好的准确性。除了沙丁胺醇,方法对盐酸克伦特罗、西布特罗、溴布特罗和马布特罗五种β受体激动剂具有很好的识别能力,本方法可以实现上述五种β受体激动剂的同时检测。综上,本研究建立的上转换标记磁分离荧光免疫检测方法,操作简单,检测快速,灵敏度高,适合动物源性食品中β受体激动剂的快速检测,为监控违禁兽药的非法使用提供了一种有用的检测工具。
刘菲[6]（2020）在《左旋R-沙丁胺醇用于治疗咪喹莫特诱发的小鼠银屑病病变及其作用机制和代谢组学研究》文中研究指明银屑病是一种常见的慢性自身免疫性疾病,临床诊断的标准为界限分明、隆起的红斑,且被银白色鳞片覆盖,因其症状的可见性以及与瘙痒、疼痛的频繁联系对患者的生理和心理带来巨大负担。针对银屑病的治疗,目前尚缺乏安全有效且经济的治疗药物。左旋R-沙丁胺醇是用于治疗哮喘的市售药物消旋沙丁胺醇的优映体,在临床上具有很高的安全性。我们前期的实验结果显示R-sal对呼吸系统免疫炎症有明显的免疫抑制和调节作用,在湿疹、系统性红斑狼疮等疾病的治疗中可以发挥一定的作用。本课题首次使用R-sal研究了左旋R-沙丁胺醇对银屑病的治疗作用,并对其作用机制和代谢组学进行研究。主要内容和研究结果如下:1.本实验中,我们应用IMQ诱导的银屑病小鼠的皮损模型来探讨左旋R-沙丁胺醇的抗银屑病作用。通过行为学评价可以发现左旋R-沙丁胺醇干预可以降低小鼠PASI评分;组织病理学评价发现左旋R-沙丁胺醇干预可以降低小鼠背部皮肤中角质细胞的异常增殖、降低Baker评分;全自动五分类血液分析可以发现左旋R-沙丁胺醇干预可以减少血液中炎性细胞浸润,特别是中性粒细胞和单核细胞的数目;酶联免疫吸附测定发现左旋R-沙丁胺醇可以降低由中性粒细胞和Th17细胞产生的IL-17的含量;流式细胞术发现左旋R-沙丁胺醇可以降低小鼠脾脏单核细胞中Th17细胞总数,增加Th细胞总数和Treg细胞总数。究其原因可能涉及到Th17/Tregs平衡的调节、降低Th17和中性粒细胞等细胞释放的IL-17的含量有关。2.基于一种用于研究两相代谢物的UHPLC-Tims-Tof-MS/MS技术的非靶向代谢组学方法,研究R-sal对小鼠银屑病的研究作用。从小鼠的血浆考察R-sal对小鼠银屑病的影响,并阐明了相关的代谢通路。通过小鼠血浆的代谢组学研究,我们鉴定出39种差异代谢物,主要涉及甘油磷脂代谢、花生四烯酸代谢和鞘磷脂代谢。经过左旋R-沙丁胺醇给药后,鉴定出来的生物标志物的表达都趋于正常,提示左旋R-沙丁胺醇可能是通过调节甘油磷脂中磷脂酰胆碱（PC）和磷脂酰乙醇胺（PS）的浓度,降低花生四烯酸通路的代谢,抑制鞘磷脂的作用而发挥抗银屑病的效果。3.通过对LPS诱导的巨噬细胞炎症模型的研究,发现左旋R-沙丁胺醇可以减轻脂多糖诱导的巨噬细胞极化,降低巨噬细胞向M1型转变的比例,降低M1型巨噬细胞分泌因子TNF-α、IL-1β、MCP-1等炎症因子的分泌,降低细胞内过多的NO和ROS分泌,降低需氧糖酵解、促进有氧氧化,且R-sal降低LPS诱导的炎症反应的作用会被β2受体抑制剂ICI-118551阻断。4.通过对LPS诱导的M1型巨噬细胞的非靶向代谢组学数据进行研究,鉴定出11种特异性标志物,发现左旋R-沙丁胺醇是通过以下三个通路来缓解炎症反应:Glycerophospholipid metabolism（甘油磷脂代谢）,Phenylalanine metabolism（苯基丙氨酸代谢）和Pentosephosphate pathway（磷酸戊糖途径）,其中甘油磷脂代谢是影响最大的代谢通路。综上所述,左旋R-沙丁胺醇在分子水平、能量水平和代谢水平上有效改善银屑病样皮损,并通过降低血液中中性粒细胞的含量、抑制巨噬细胞向M1型转化、抑制幼稚T细胞向Th17转化,增加Treg细胞的比例,并通过调节甘油磷脂代谢、花生四烯酸代谢、鞘磷脂代谢、苯基丙氨酸代谢和磷酸戊糖途径来发挥抗银屑病的作用,为银屑病的治疗提供一种新的可能。
赵领娣[7]（2019）在《基于DNA信号放大技术超灵敏检测水中沙丁胺醇》文中提出沙丁胺醇是一种肾上腺素能受体激动剂,因非法使用产生的环境残留,严重影响人类的身体健康,因此针对其建立一种超灵敏检测方法尤为重要。目前的一些检测技术以大型仪器为主,很难满足现场需要。本文建立了一种基于免疫磁珠、桥接DNA与两种不同的DNA扩增技术相结合的高灵敏、特异性检测沙丁胺醇（SAL）的方法。首先,分别在3端和5端修饰了完全抗原形成邻位连接探针,通过偶联磁珠的抗体特异性识别两个邻位连接探针,在桥接DNA（bridge）的桥接作用下将两个邻位探针连接形成全长扩增子,以此为模板通过两种DNA扩增技术实现信号放大。两种DNA信号放大技术分别是实时荧光定量PCR（qPCR）技术和链置换扩增（SDA）技术。结果表明,该方法的设计具有较高的灵敏度,其中,在使用实时荧光定量PCR方法检测SAL的线性范围为1.0×10-21.0×103 ng·mL-1,检出限为1.20×10-22 ng·mL-1,测定在自来水中SAL的加标回收率在87.1%108.8%之间;在使用链置换扩增技术检测SAL的线性范围为1.0×10-31.0×102 pg·mL-1,检出限为2.90 fg·mL-1,测定在自来水样品中SAL的加标回收率在93.1%103.3%之间。两种方法在其结构功能类似物中具有良好的特异性。本研究通过设计免疫磁珠、桥接DNA在不同的扩增技术下实现对沙丁胺醇的高灵敏检测,搭建了一个高特异性、通用的检测平台。
陈飞亚,胥翠,魏天航,许佑君[8]（2017）在《左旋沙丁胺醇的合成工艺改进及有关物质研究》文中认为目的借助HPLC对左旋沙丁胺醇合成过程中的主要中间体、有关物质和终产品进行检测,建立HPLC检测方法,优化左旋沙丁胺醇的合成工艺。方法以水杨醛为起始原料,经傅克反应、选择性还原醛羰基、丙叉基保护、叔丁胺氨解、酮羰基还原、脱保护和成盐等步骤得到沙丁胺醇。针对特定路线,制备了5种可能的有关物质。并在此基础上以化合物7为前体,经L-（+）-酒石酸拆分得到左旋沙丁胺醇。结果目标产物结构经MS和1H-NMR确证。反应总收率为42.1%（以水杨醛计）,终产品纯度达到99.4%,拆分收率为34.7%（以化合物7计）。结论本文建立了沙丁胺醇合成过程中涉及的主要中间体、有关物质和终产品的HPLC检测方法,可以有效监控产品质量。反应路线原料易得,操作简便,适合工业化生产。该研究将为该药的一致性评价奠定研究基础。
姜文梦[9]（2017）在《基于沙丁胺醇抗体的β激动剂广谱免疫分析及3D-QSAR研究》文中研究说明β激动剂是一类临床上用于治疗支气管哮喘的药物。然而,由于一些β激动剂药物具有促进骨骼肌（瘦肉）生长、减少脂肪蓄积的作用,因而被当做“瘦肉精”非法添加于动物性食品中。严重危害了消费者的身体健康。包括中国在内的许多国家都先后立法,明令禁止了在食品中将β激动剂类药物作为“瘦肉精”进行非法添加。针对β激动剂的免疫检测方法,具有高灵敏度,检测用时短,处理步骤简单等优点,在食品安全领域有广泛的应用前景。但前人的研究,多建立特异性方法,无法在一次实验中同步检测多种β激动剂。因此,开发出一种针对β激动剂的广谱性免疫检测方法,是十分有必要的。本文选取选取β激动剂沙丁胺醇为研究对象,分别采用其消旋体和左旋体进行衍生并免疫得到多克隆抗体,建立了高灵敏度的酶联免疫分析方法和荧光偏振免疫分析方法,并根据抗体与小分子识别的交叉反应数据进行了定量构效关系分析,阐明了沙丁胺醇抗体与小分子的识别机制,并对广谱性半抗原设计提出了指导意见。（1）沙丁胺醇荧光偏振方法的建立采用琥珀酸酐法合成消旋及左旋沙丁胺醇免疫原。免疫新西兰大白兔,获得多克隆抗体。将沙丁胺醇衍生物分别用不同长度的荧光素EDF,HDF偶联获得四种荧光示踪物。经反应条件优化,建立荧光偏振免疫分析方法。Rac-sal-suc-EDF作为荧光示踪物所建立的标曲半抑制浓度(IC50)为5.81 ng/mL,检测范围为1.43-23.56ng/mL;Rac-sal-suc-HDF作为荧光示踪物所建立的标曲IC50为25.87 ng/mL,检测范围为7.77-86.24 ng/mL;R-sal-suc-EDF作为荧光示踪物所建立的标曲IC50为85.80 ng/mL,检测范围为29.49-249.68 ng/mL,而R-sal-suc-HDF作为荧光示踪物所建立的标曲IC50为197.98 ng/mL,检测范围为99.94-392.17 ng/mL。四种荧光示踪物所建立的荧光偏振方法分别能识别26,24,25和21种β激动剂。（2）沙丁胺醇间接竞争酶联免疫分析方法建立采用琥珀酸酐法合成消旋及左旋沙丁胺醇包被原,与多克隆抗体反应,建立间接竞争酶联免疫分析方法。左旋抗体的IC50为0.5 ng/mL,检测范围为0.05-4.00ng/mL,LOD为0.04 ng/mL。消旋抗体的IC50为2.10 ng/mL,检测范围(IC20-IC80)为0.11到40.86 ng/mL,检测限（LOD）为0.02 ng/mL。左旋抗体和消旋抗体分别可识别33和29种β激动剂。添加回收实验中,向猪尿样品中分别添加沙丁胺醇、克伦特罗、溴布特罗及西布特罗药物,添加回收率为81.3-118.3%,且变异系数均小于15%,与高效液相-质谱联用方法进行比对,两种方法检测样品的结果存在良好相关性,证明两种抗体的间接竞争酶联免疫分析方法准确可靠。（3）沙丁胺醇抗体对小分子的广谱性识别机制研究基于沙丁胺醇抗体的交叉反应结果,应用CoMFA和CoMSIA两种算法,建立对沙丁胺醇的广谱性识别模型。结果表明:抗体与小分子作用时,存在多个结合位点。其中C-2和C-2?的叔丁基位置适当增大基团体积,有利于抗体识别。苯环C-2负电性增大,C-1和C-6所连接的基团负电性减小,会提高抗体对小分子的亲和力。而C-1?手性碳上的羟基和C-2?上所连接的叔丁基则由于疏水作用,而对抗体识别产生重要影响。此外,根据QSAR结果推断,右旋沙丁胺醇免疫所获得的抗体由于C-1?手性碳上所连接的羟基转向靠近疏水腔的一端,降低了抗体识别小分子的能力,因此左旋沙丁胺醇免疫得到的抗体表现出比消旋药物免疫得到的抗体更佳的广谱性。基于本研究对沙丁胺醇抗体识别小分子时重要位点的分析以及其它文献报道中对不同半抗原免疫所得抗体的交叉反应分析得出,小分子衍生手臂制备半抗原时,尽可能多的暴露重要识别位点,有利于提高免疫所得抗体的广谱性。通过本研究,建立了两种具有高灵敏度及广谱性的β激动剂免疫检测方法,并研究了沙丁胺醇抗体对小分子的广谱性识别机制,分析讨论了广谱性半抗原设计应遵循的规则,为β激动剂广谱性半抗原设计及免疫检测方法建立提供了重要参考。
王彤彤,王敏,宋印清,汤晓艳,周剑,杨梦瑞,毛雪飞[10]（2016）在《苯乙醇胺类药物合成方法的研究进展》文中指出哮喘是一种常见的多发呼吸系统疾病,其患病部位在气管、支气管、肺部及胸腔。苯乙醇胺类药物是治疗哮喘的一线药物,是临床应用最广的支气管扩张剂。这类药物是一种选择性的肾上腺素受体激动剂,具有很好的疗效和广阔的市场前景。在国内外文献报道和专利中,苯乙醇胺类药物的合成方法很多。结合药物骨架的结构特点,将其归纳为5种不同的合成路线,并论述了这5种合成方法的研究进展及其优缺点。同时,对合成方法手性中心的合成和适用范围进行了总结,对药物开发提供有益帮助。
二、(R)-沙丁胺醇的合成研究进展（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、(R)-沙丁胺醇的合成研究进展（论文提纲范文）
（1）表面等离子体共振直接法快速检测牛尿中克伦特罗和沙丁胺醇（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩写词表(Abbreviations) |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 β_2受体激动剂的简介 |
| 1.1.1 β_2受体激动剂的理化性质 |
| 1.1.2 β_2受体激动剂的药学作用和毒副作用 |
| 1.1.2.1 药学作用 |
| 1.1.2.2 毒副作用 |
| 1.1.3 国内外监控现状 |
| 1.1.4 检测方法研究 |
| 1.2 表面等离子体生物传感器 |
| 1.2.1 SPR生物传感器的基本原理 |
| 1.2.2 SPR生物传感器的分类及特点 |
| 1.2.3 SPR生物传感器在β_2-受体激动剂中的研究进展 |
| 1.3 研究内容及意义 |
| 第二章 克伦特罗和沙丁胺醇单克隆抗体的制备 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 主要仪器 |
| 2.1.2 主要试剂 |
| 2.1.3 主要溶液配制 |
| 2.1.4 实验所用动物和细胞 |
| 2.2 克伦特罗单克隆抗体的制备 |
| 2.2.1 动物免疫 |
| 2.2.2 细胞融合 |
| 2.2.3 阳性孔的筛选与克隆 |
| 2.2.4 腹水制备 |
| 2.2.5 单克隆抗体性质的鉴定 |
| 2.3 结果 |
| 2.3.1 包被抗原的工作浓度及阳性血清效价 |
| 2.3.2 杂交瘤细胞的筛选和稳定性 |
| 2.3.3 单抗亚类鉴定 |
| 2.3.4 单抗性质鉴定 |
| 2.4 本章小结 |
| 第三章 SPR检测克伦特罗 |
| 3.1 实验材料 |
| 3.1.1 药品与试剂 |
| 3.1.2 仪器与设备 |
| 3.1.3 相关溶液的配制 |
| 3.2 实验方法 |
| 3.2.1 克伦特罗抗体的固定 |
| 3.2.2 再生条件的选择 |
| 3.2.3 抗原-抗体动力学实验 |
| 3.2.4 建立标准曲线 |
| 3.2.5 特异性 |
| 3.2.6 稳定性和重复性 |
| 3.2.7 准确度和精密度 |
| 3.2.8 SPR传感器和UPLC-MS/MS的比较 |
| 3.3 结果与分析 |
| 3.3.1 克伦特罗抗体的固定 |
| 3.3.2 再生条件的确定 |
| 3.3.3 抗原-抗体动力学分析 |
| 3.3.4 标准曲线的构建 |
| 3.3.5 特异性 |
| 3.3.6 稳定性和重复性 |
| 3.3.7 准确度和精密度 |
| 3.3.8 SPR生物传感器和UPLC-MS/MS比较 |
| 3.4 本章小结 |
| 第四章 SPR检测沙丁胺醇 |
| 4.1 实验材料 |
| 4.1.1 药品与试剂 |
| 4.1.2 仪器与设备 |
| 4.1.3 相关溶液配制 |
| 4.2 实验方法 |
| 4.2.1 抗体的固定 |
| 4.2.2 再生条件的确定 |
| 4.2.3 抗原-抗体动力学分析 |
| 4.2.4 标准曲线的构建 |
| 4.2.5 特异性分析 |
| 4.2.6 稳定性和重复性 |
| 4.2.7 准确度和精密度 |
| 4.2.8 SPR生物传感器和UPLC-MS/MS比较 |
| 4.4 小结 |
| 结论 |
| 1 制备了抗克伦特罗和抗沙丁胺醇单克隆抗体 |
| 2 建立了检测牛尿中的克伦特罗和沙丁胺醇的SPR直接检测法 |
| 创新点 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 |
| 致谢 |
（2）左旋R-沙丁胺醇凝胶剂的制备与银屑病治疗效果的验证（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 银屑病的概况 |
| 1.1.1 银屑病流行病学及发病机制研究 |
| 1.1.2 银屑病治疗药物的研究进展 |
| 1.2 凝胶制剂 |
| 1.3 手性药物—左旋R-沙丁胺醇 |
| 1.4 研究意义及主要内容 |
| 1.4.1 研究意义 |
| 1.4.2 主要研究内容 |
| 第二章 左旋R-沙丁胺醇凝胶剂成型工艺的研究 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 实验材料及仪器 |
| 2.2.1 实验材料 |
| 2.2.2 实验仪器 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.3.1 凝胶剂制备方案 |
| 2.3.2 凝胶剂配方设计 |
| 2.3.3 凝胶剂基质筛选 |
| 2.3.4 凝胶基质用量考察 |
| 2.3.5 保湿剂用量考察 |
| 2.3.6 工艺验证 |
| 2.4 实验结果及讨论 |
| 2.4.1 凝胶剂基质筛选 |
| 2.4.2 凝胶基质用量考察 |
| 2.4.3 保湿剂用量考察 |
| 2.4.4 工艺验证 |
| 2.5 本章小结 |
| 第三章 左旋R-沙丁胺醇凝胶剂质量标准及稳定性研究 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 实验材料及仪器 |
| 3.2.1 实验材料 |
| 3.2.2 实验仪器 |
| 3.3 实验方法 |
| 3.3.1 左旋R-沙丁胺醇光学纯度检测 |
| 3.3.2 左旋R-沙丁胺醇凝胶含量检测方法及验证 |
| 3.3.3 左旋R-沙丁胺醇凝胶有关物质检测方法及验证 |
| 3.3.4 左旋R-沙丁胺醇凝胶初步稳定性考察 |
| 3.4 实验结果及讨论 |
| 3.4.1 左旋R-沙丁胺醇右旋体检测 |
| 3.4.2 左旋R-沙丁胺醇凝胶含量检测方法及验证 |
| 3.4.3 左旋R-沙丁胺醇凝胶有关物质检测方法及验证 |
| 3.4.4 左旋R-沙丁胺醇凝胶稳定性的初步考察 |
| 3.5 本章小结 |
| 第四章 左旋R-沙丁胺醇凝胶剂药效研究 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 实验材料及仪器 |
| 4.2.1 实验动物 |
| 4.2.2 实验材料 |
| 4.2.3 实验仪器 |
| 4.3 实验方法 |
| 4.3.1 动物模型造模 |
| 4.3.2 形态学评价 |
| 4.3.3 组织学评价 |
| 4.3.4 小鼠全身评价 |
| 4.4 实验结果及讨论 |
| 4.4.1 形态学评价 |
| 4.4.2 组织学评价 |
| 4.4.3 小鼠全身评价 |
| 4.5 本章小结 |
| 结论与展望 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间取得与学位论文相关的成果 |
| 致谢 |
（3）β2-AR/ERK1/2通路调控胃癌细胞EMT和迁移、侵袭作用的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 英文缩写 |
| 引言 |
| 第一部分 β2-AR对胃癌细胞迁移和侵袭能力的影响 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 附图 |
| 附表 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第二部分 β2-AR-ERK1/2通路调控胃癌细胞 EMT和迁移、侵袭作用的研究 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 附图 |
| 附表 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 结论 |
| 综述 神经递质和胃癌的研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（4）(R)-左旋沙丁胺醇经鼻给药在大鼠帕金森疾病模型的治疗作用（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 英文缩略词表 |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 帕金森疾病 |
| 1.1.1 帕金森疾病概述 |
| 1.1.2 发病机制及治疗方法 |
| 1.2 动物模型 |
| 1.2.1 毒素模型 |
| 1.2.2 基因模型 |
| 1.2.3 其他模型 |
| 1.3 鼻腔给药 |
| 1.3.1 鼻腔给药脑靶向研究现状 |
| 1.3.2 鼻腔给药药物递送途径与机制 |
| 1.3.3 影响鼻腔给药的因素 |
| 1.3.4 鼻内给药的前景 |
| 1.4 沙丁胺醇 |
| 1.4.1 沙丁胺醇概述及左右旋疗效差异 |
| 1.4.2 沙丁胺醇与帕金森疾病 |
| 1.5 研究意义与内容 |
| 1.5.1 研究意义 |
| 1.5.2 研究内容 |
| 第二章 左旋硫酸沙丁胺醇滴鼻剂溶液质量研究 |
| 2.1 前言 |
| 2.2 实验仪器与材料 |
| 2.2.1 实验仪器 |
| 2.2.2 实验试剂 |
| 2.3 方法 |
| 2.3.1 有关物质检测方法开发 |
| 2.3.2 含量测定检测方法的研究与验证 |
| 2.3.3 制备三批样品并考察 |
| 2.4 结果与讨论 |
| 2.4.1 有关物质检测 |
| 2.4.2 含量测定检测方法的研究与验证 |
| 2.4.3 三批样品考察结果 |
| 2.5 本章小结 |
| 第三章 基于DESI-MS研究(R)-沙丁胺醇经鼻和静脉给药后在SD大鼠脑内空间分布 |
| 3.1 前言 |
| 3.2 实验仪器与试剂 |
| 3.2.1 实验试剂 |
| 3.2.2 实验试剂 |
| 3.2.3 动物 |
| 3.3 方法 |
| 3.3.1 组织取样和制备 |
| 3.3.2 数据采集与处理 |
| 3.3.3 成像扫描 |
| 3.3.4 (R)-沙丁胺醇在大鼠脑内的空间分布 |
| 3.3.5 大鼠脑内(R)-沙丁胺醇子离子的空间分布图 |
| 3.4 结果与讨论 |
| 3.4.1 成像步骤 |
| 3.4.2 沙丁胺醇在大鼠脑内的空间分布 |
| 3.4.3 大鼠脑内(R)-沙丁胺醇裂解分子的空间分布图 |
| 3.5 小结 |
| 第四章 (R)-沙丁胺醇对鱼藤酮诱导的帕金森SD大鼠的行为学改善作用 |
| 4.1 前言 |
| 4.2 实验仪器与试剂 |
| 4.2.1 实验试剂 |
| 4.2.2 实验试剂 |
| 4.2.3 动物 |
| 4.3 方法 |
| 4.3.1 实验动物分组 |
| 4.3.2 溶液配制 |
| 4.3.3 左旋沙丁胺醇给药剂量 |
| 4.3.4 模型建立 |
| 4.3.5 行为学药效评价 |
| 4.4 结果与讨论 |
| 4.4.1 网格实验 |
| 4.4.2 悬挂实验 |
| 4.4.3 跨步实验 |
| 4.4.4 旷场实验 |
| 4.4.5 斜板实验 |
| 4.5 小结 |
| 第五章 (R)-沙丁胺醇对鱼藤酮诱导的帕金森SD大鼠的病理学改善作用 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 实验仪器与试剂 |
| 5.2.1 实验试剂 |
| 5.2.2 实验试剂 |
| 5.3 方法 |
| 5.3.1 实验动物分组 |
| 5.3.2 取材 |
| 5.3.3 免疫组化主要配制及配制 |
| 5.3.4 实验操作 |
| 5.4 结果与讨论 |
| 5.4.1 GFAP |
| 5.4.2 TH |
| 5.4.3 α-突触核蛋白 |
| 5.4.4 显着性分析 |
| 5.5 小结 |
| 第六章 左旋沙丁胺醇毒理实验 |
| 6.1 引言 |
| 6.2 实验仪器与试剂 |
| 6.2.1 实验仪器 |
| 6.2.2 实验试剂 |
| 6.3 方法 |
| 6.3.1 CCK8法细胞毒性实验 |
| 6.3.2 蟾蜍粘膜毒性实验 |
| 6.3.3 鼻腔给药左旋沙丁胺醇对SD大鼠心率影响 |
| 6.4 结果与讨论 |
| 6.4.1 细胞毒理实验 |
| 6.4.2 左旋及右旋沙丁胺醇对蟾蜍上腭纤毛输送能力的影响 |
| 6.4.3 鼻腔给药左旋沙丁胺醇对SD大鼠心率影响 |
| 6.5 小结 |
| 结论与展望 |
| 参考文献 |
| 攻读博士学位期间取得的研究成果 |
| 致谢 |
（5）沙丁胺醇上转换标记磁分离荧光免疫检测方法研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 1 前言 |
| 1.1 β受体激动剂概述 |
| 1.2 沙丁胺醇(SAL)的简介 |
| 1.2.1 沙丁胺醇(SAL)的理化性质 |
| 1.2.2 沙丁胺醇(SAL)的药理及毒理作用 |
| 1.2.3 沙丁胺醇(SAL)的限量标准 |
| 1.2.4 沙丁胺醇(SAL)检测方法研究进展 |
| 1.3 上转换荧光纳米材料 |
| 1.3.1 上转换荧光纳米材料的概述 |
| 1.3.2 上转换荧光纳米材料的合成方法 |
| 1.3.3 上转换荧光纳米材料的表面修饰 |
| 1.3.4 上转换荧光纳米材料的应用 |
| 1.4 磁性微球概述 |
| 1.4.1 磁性微球的性质 |
| 1.4.2 磁性微球的应用 |
| 1.5 论文研究的目的及意义 |
| 1.6 研究内容 |
| 2. 实验材料与方法 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 主要实验试剂药品 |
| 2.1.2 主要实验仪器与材料 |
| 2.1.3 实验所需溶液的配制 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 上转换荧光纳米材料的合成及表征 |
| 2.2.2 沙丁胺醇抗体(IgG)的纯化 |
| 2.2.3 沙丁胺醇包被原的制备 |
| 2.2.4 沙丁胺醇上转换荧光标记-磁分离免疫检测方法的建立 |
| 2.2.5 沙丁胺醇上转换荧光标记-磁分离免疫检测方法的原理 |
| 2.2.6 标准曲线的建立,检测限的确定和检测范围的确定 |
| 2.2.7 沙丁胺醇上转换荧光标记-磁分离免疫检测方法的特异性分析 |
| 2.2.8 肉类样品的处理方法 |
| 2.2.9 添加回收率的测定 |
| 2.2.10 LC-MS/MS和商业化ELISA试剂盒验证方法的有效性 |
| 3 结果讨论 |
| 3.1 沙丁胺醇包被原和抗体的有效性验证 |
| 3.2 上转换纳米材料的表征 |
| 3.2.1 荧光光谱 |
| 3.2.2 透射电镜 |
| 3.2.3 粒径分布 |
| 3.2.4 傅立叶红外光谱 |
| 3.3 沙丁胺醇上转换荧光标记-磁分离免疫检测方法的建立 |
| 3.3.1 感应探针中包被原添加量的初步优化 |
| 3.3.2 信号探针中抗体添加量的初步优化 |
| 3.3.3 探针中的蛋白添加量及检测体系中感应探针添加量的最终确定 |
| 3.3.4 反应时间的优化 |
| 3.3.5 沙丁胺醇上转换荧光标记-磁分离免疫检测方法检测限的确定 |
| 3.3.6 沙丁胺醇上转换荧光标记-磁分离免疫检测方法的特异性分析 |
| 3.3.7 肉类样品处理方法的确定 |
| 3.3.8 样品添加回收率的测定及验证方法的有效性 |
| 4 结论 |
| 4.1 全文总结 |
| 4.2 论文的创新点 |
| 4.3 论文的不足之处 |
| 5 展望 |
| 6 参考文献 |
| 7 攻读硕士学位期间发表论文情况 |
| 8 致谢 |
（6）左旋R-沙丁胺醇用于治疗咪喹莫特诱发的小鼠银屑病病变及其作用机制和代谢组学研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 英文缩略词表 |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 银屑病 |
| 1.1.1 银屑病的流行病学研究 |
| 1.1.2 银屑病发病机制的主要学说 |
| 1.1.3 银屑病与T淋巴细胞 |
| 1.1.4 银屑病与巨噬细胞 |
| 1.1.5 银屑病与中性粒细胞 |
| 1.2 银屑病现有药物治疗方法及局限 |
| 1.2.1 生物制剂 |
| 1.2.2 天然药物 |
| 1.2.3 化学药物 |
| 1.2.4 其他 |
| 1.3 现有银屑病动物模型 |
| 1.3.1 自发性小鼠模型 |
| 1.3.2 基因工程模型小鼠 |
| 1.3.3 异种移植模型 |
| 1.3.4 直接诱导模型 |
| 1.3.5 体外模型 |
| 1.4 β2受体激动剂的生物效应及其潜在治疗作用 |
| 1.4.1 抗哮喘作用 |
| 1.4.2 抗疤痕形成作用 |
| 1.4.3 对免疫系统作用 |
| 1.5 研究意义与主要内容 |
| 1.5.1 研究意义 |
| 1.5.2 研究内容 |
| 第二章 左旋R-沙丁胺醇对银屑病的治疗作用 |
| 2.1 前言 |
| 2.2 实验材料和方法 |
| 2.2.1 实验动物 |
| 2.2.2 实验试剂 |
| 2.2.3 实验仪器 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.3.1 银屑病小鼠造模及分组 |
| 2.3.2 形态学评价 |
| 2.3.3 组织学评价 |
| 2.3.4 血液分析 |
| 2.3.5 小鼠全身评价 |
| 2.3.6 流式细胞术测小鼠脾脏中Th17及Treg细胞的比例 |
| 2.3.7 数据分析 |
| 2.4 结果 |
| 2.4.1 小鼠造模给药后行为学评价 |
| 2.4.2 小鼠耳部HE染色 |
| 2.4.3 小鼠背部组织学评价 |
| 2.4.4 小鼠造模后全身评价 |
| 2.4.5 小鼠造模后的血液分析 |
| 2.4.6 ELISA测小鼠血液中IL-17的含量 |
| 2.4.7 小鼠脾脏细胞中Th17和Treg细胞的比例测定 |
| 2.5 讨论 |
| 2.6本章小结 |
| 第三章 基于UHPLC-Tims-MS/MS的代谢组学分析评价左旋R-沙丁胺醇对IMQ诱导的小鼠银屑病模型的影响 |
| 3.1 前言 |
| 3.2 实验材料 |
| 3.2.1 实验试剂 |
| 3.2.2 实验仪器 |
| 3.2.3 实验动物 |
| 3.3 实验方法 |
| 3.3.1 实验动物分组及给药 |
| 3.3.2 小鼠血浆的采集 |
| 3.3.3 小鼠血浆样品预处理 |
| 3.3.4 小鼠血浆QC (quality control)样品的制备 |
| 3.3.5 UHPLC- Tims-TOF-MSMS对小鼠血浆的分析 |
| 3.3.6 UHPLC- Tims-TOF-MSMS方法学的验证 |
| 3.3.7 样本进样顺序 |
| 3.3.8 UHPLC- Tims-TOF-MSMS数据的采集及代谢物的鉴定 |
| 3.3.9 差异代谢物的筛选以及通路分析 |
| 3.3.10 数据分析 |
| 3.4 结果 |
| 3.4.1 血浆样品的UHPLC-Tims-TOF-MSMS方法学验证 |
| 3.4.2 各组小鼠血浆代谢物的PCA和PLS-DA分析 |
| 3.4.3 血浆中生物标记物的筛选 |
| 3.4.4 血浆中生物标记物的鉴定 |
| 3.4.5 血浆中生物标记物的的代谢通路分析 |
| 3.5 讨论 |
| 3.6 本章小结 |
| 第四章 左旋R-沙丁胺醇对巨噬细胞的调控作用 |
| 4.1 前言 |
| 4.2 实验材料 |
| 4.2.1 细胞株 |
| 4.2.2 实验试剂 |
| 4.2.3 实验仪器 |
| 4.3 实验方法 |
| 4.3.1 RAW264.7巨噬细胞的培养、造模及给药 |
| 4.3.2 激光共聚焦显微镜观察巨噬细胞内NO的变化 |
| 4.3.3 激光共聚焦显微镜观察巨噬细胞内ROS的变化 |
| 4.3.4 ELISA检测细胞上清中细胞因子TNF-α、IL-1β、MCP-1、GSH的含量 |
| 4.3.5 流式细胞术观察R-sal对LPS诱导的M1型和M2型巨噬细胞的影响 |
| 4.3.6 Griess法测细胞上清液中亚硝酸根的含量 |
| 4.3.7 RT-PCR测细胞内iNOS mRNA含量 |
| 4.3.8 蛋白免疫印迹法测iNOS的含量 |
| 4.3.9 流式间接荧光标记检测M1巨噬细胞细胞的表达 |
| 4.3.10 OCR、ECAR的测定 |
| 4.3.11 数据分析 |
| 4.4 结果 |
| 4.4.1 左旋R-沙丁胺醇对细胞LPS诱导的炎症细胞内的NO的影响 |
| 4.4.2 左旋R-沙丁胺醇降低LPS诱导的氧化应激反应 |
| 4.4.3 左旋R-沙丁胺醇对巨噬细胞极化的影响 |
| 4.4.4 左旋R-沙丁胺醇抑制LPS诱导的RAW264.7细胞向M1巨噬细胞转化 |
| 4.4.5 左旋R-沙丁胺醇对M1型细胞因子的影响 |
| 4.4.6 左旋R-沙丁胺醇抑制糖酵解增加有氧呼吸 |
| 4.5 讨论 |
| 4.6 本章小结 |
| 第五章 代谢组学研究左旋R-沙丁胺醇对LPS诱导的M1型巨噬细胞物质代谢 |
| 5.1 前言 |
| 5.2 实验材料 |
| 5.3 实验方法 |
| 5.3.1 分组及给药 |
| 5.3.2 RAW264.7巨噬细胞样品的收集 |
| 5.3.3 细胞样品预处理 |
| 5.3.4 细胞样品QC样品制备 |
| 5.3.5 UHPLC -Tims-TOF-MSMS对细胞裂解样品的分析 |
| 5.3.6 方法学验证 |
| 5.3.7 样本进样顺序 |
| 5.3.8 数据采集及代谢物鉴定 |
| 5.3.9 差异代谢物筛选及相关通路分析方法 |
| 5.3.10 数据分析 |
| 5.4 实验结果 |
| 5.4.1 细胞样品的UHPLC-Tims-TOF-MSMS方法学验证 |
| 5.4.2 细胞样品的代谢物的PCA和PLS-DA分析 |
| 5.4.3 细胞样品的生物标记物的筛选 |
| 5.4.4 细胞样品的生物标记物的鉴定 |
| 5.4.5 细胞样品的生物标记物的的代谢通路分析 |
| 5.5 讨论 |
| 5.6 本章小结 |
| 结论与展望 |
| 参考文献 |
| 攻读博士学位期间取得的研究成果 |
| 致谢 |
（7）基于DNA信号放大技术超灵敏检测水中沙丁胺醇（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第1章 绪论 |
| 1.1 论文的研究背景 |
| 1.1.1 研究背景 |
| 1.1.2 选题意义 |
| 1.2 沙丁胺醇相关检测技术简介 |
| 1.2.1 酶联免疫检测技术 |
| 1.2.2 邻位连接技术 |
| 1.2.3 实时荧光定量PCR技术 |
| 1.2.4 恒温扩增技术 |
| 1.2.5 DNA分子机器 |
| 1.2.6 基因工程工具酶 |
| 1.3 研究内容 |
| 第2章 基于桥接DNA的实时荧光定量PCR方法检测沙丁胺醇 |
| 2.1 实验部分 |
| 2.1.1 实验仪器 |
| 2.1.2 实验试剂 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 实验原理 |
| 2.2.2 沙丁胺醇抗体效价及亲和性测定 |
| 2.2.3 免疫磁珠的制备 |
| 2.2.4 蛋白定量 |
| 2.2.5 DM探针的制备 |
| 2.2.6 检测方法的建立 |
| 2.2.7 特异性 |
| 2.2.8 模拟实际样品检测方法 |
| 2.3 实验结果 |
| 2.3.1 可行性分析 |
| 2.3.2 条件优化 |
| 2.3.3 方法性能 |
| 2.3.4 特异性检测 |
| 2.3.5 样品加标模拟检测 |
| 2.4 本章小结 |
| 第3章 基于桥接DNA的链置换反应超灵敏检测沙丁胺醇 |
| 3.1 实验部分 |
| 3.1.1 实验仪器 |
| 3.1.2 实验试剂 |
| 3.2 实验方法 |
| 3.2.1 实验原理 |
| 3.2.2 免疫磁珠的制备 |
| 3.2.3 DM探针的制备 |
| 3.2.4 方法性能检测 |
| 3.2.5 特异性检测 |
| 3.2.6 样品加标模拟实验 |
| 3.2.7 方法学比对 |
| 3.3 实验结果 |
| 3.3.1 可行性分析 |
| 3.3.2 条件优化 |
| 3.3.3 方法性能 |
| 3.3.4 特异性检验 |
| 3.3.5 样品加标模拟实验 |
| 3.3.6 方法学比对 |
| 3.4 本章小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 攻读硕士学位期间所发表的论文 |
| 致谢 |
（8）左旋沙丁胺醇的合成工艺改进及有关物质研究（论文提纲范文）
| 1 目标产物及其相关物质的合成 |
| 2 合成实验 |
| 2.1 5-氯乙酰基-2-羟基苯甲醛 (3) 的合成 |
| 2.2 2-氯-1- (4-羟基-3- (羟甲基) 苯基) 乙酮 (4) 的合成 |
| 2.3 2-氯-1- (2, 2-二甲基-4H-1, 3-苯并二恶英-6-基) 乙酮 (5) 的合成 |
| 2.4 1- (2, 2-二甲基-4H-1, 3-苯并二恶英-6-基) -2-[ (1, 1-二甲基乙基) 氨]乙酮 (6) 的合成 |
| 2.5 α-[[ (1, 1-二甲基乙基) 氨基]甲基]-2, 2-二甲基-4H-1, 3-苯并二恶英-6-甲醇 (7) 的合成 |
| 2.6 沙丁胺醇硫酸盐 (1) 的合成与纯化 |
| 2.7 盐酸左旋沙丁胺醇的合成 |
| 2.8 有关物质A的合成 |
| 2.8.1 1- (4-羟基-3-甲氧基甲基苯基) 乙酮的合成 |
| 2.8.2 2'-溴-1- (4-羟基-3-甲氧基甲基苯基) 乙酮的合成 |
| 2.8.3 沙丁胺醇单甲醚 (有关物质A) 的合成 |
| 2.9 有关物质B的合成 |
| 2.1 0 有关物质C的合成 |
| 2.1 0. 1 氨基乙酰水杨醛的合成 |
| 2.1 0. 2 α-氨甲基-4-羟基-1, 3-苯二甲醇 (有关物质C) 的合成 |
| 2.1 1 有关物质D的合成 |
| 2.1 2 有关物质E的合成 |
| 3 结果与讨论 |
（9）基于沙丁胺醇抗体的β激动剂广谱免疫分析及3D-QSAR研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 中英文缩写对照表 |
| 1 前言 |
| 1.1β 激动剂概述 |
| 1.1.1 β 激动剂的分类 |
| 1.1.2 β 激动剂的作用机制 |
| 1.1.3 β 激动剂检测方法 |
| 1.2 荧光偏振免疫分析 |
| 1.2.1 荧光偏振的基本原理 |
| 1.2.2 荧光偏振免疫分析原理 |
| 1.2.3 荧光偏振在食品检测中的应用 |
| 1.3 广谱性免疫分析 |
| 1.3.1 混和抗体 |
| 1.3.2 广谱性抗体 |
| 1.3.3 β-激动剂广谱性抗体研究进展 |
| 1.3.4 广谱性抗体制备存在的问题 |
| 1.4 分子模拟辅助研究抗体与小分子间识别机制研究进展 |
| 1.4.1 定量构效关系的原理及方法 |
| 1.4.2 定量构效关系在抗原抗体识别机制中的应用 |
| 1.5 本研究目的意义及总体思路 |
| 1.5.1 研究目的及意义 |
| 1.5.2 研究的内容与技术路线 |
| 2 沙丁胺醇荧光偏振免疫检测方法建立 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 试剂与材料 |
| 2.1.2 仪器与设备 |
| 2.1.3 常用缓冲液和标准溶液的配制 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 半抗原合成鉴定 |
| 2.2.2 多克隆抗体的制备 |
| 2.2.3 荧光示踪物的合成 |
| 2.2.4 荧光示踪物的鉴定 |
| 2.2.5 荧光示踪物工作浓度及抗体工作浓度的优化 |
| 2.2.6 稀释缓冲液选择 |
| 2.2.7 Tween浓度优化 |
| 2.2.8 标准曲线的建立 |
| 2.2.9 特异性评价 |
| 2.3 结果与分析 |
| 2.3.1 半抗原合成与鉴定 |
| 2.3.2 抗体检测 |
| 2.3.3 抗体纯化 |
| 2.3.4 荧光示踪物的合成与鉴定 |
| 2.3.5 荧光示踪物工作浓度的优化 |
| 2.3.6 稀释缓冲液选择 |
| 2.3.7 Tween浓度优化 |
| 2.3.8 标准曲线的建立 |
| 2.3.9 交叉反应 |
| 2.4 小结 |
| 3 沙丁胺醇间接竞争酶联免疫分析方法建立 |
| 3.1 实验材料 |
| 3.1.1 试剂与材料 |
| 3.1.2 仪器与设备 |
| 3.1.3 常用缓冲液的配制 |
| 3.2 实验方法 |
| 3.2.1 ciELISA分析方法 |
| 3.2.2 统计学分析 |
| 3.2.3 交叉反应 |
| 3.2.4 样品前处理 |
| 3.2.5 添加回收 |
| 3.2.6 方法验证 |
| 3.3 结果与分析 |
| 3.3.1 ciELISA方法优化 |
| 3.3.2 标准曲线绘制 |
| 3.3.3 交叉反应 |
| 3.3.4 基质干扰 |
| 3.3.5 添加回收 |
| 3.3.6 方法验证 |
| 3.4 小结 |
| 4 三维定量构效关系分析 |
| 4.1 实验方法 |
| 4.1.1 分子模拟数据选择与构象优化 |
| 4.2 实验结果 |
| 4.2.1 3D QSAR模型建立 |
| 4.2.2 3D QSAR结果分析 |
| 4.3 小结 |
| 5 讨论 |
| 5.1 半抗原手臂位置对沙丁胺醇抗体识别广谱性的影响 |
| 5.2 半抗原旋光性对广谱性的影响 |
| 5.3 FPIA和ciELISA方法比较 |
| 6 结论 |
| 7 展望 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附录 作者攻读硕士学位期间科研成果情况 |
（10）苯乙醇胺类药物合成方法的研究进展（论文提纲范文）
| 1 苯乙醇胺类药物结构特征 |
| 2 苯乙醇胺类药物的合成方法 |
| 2.1 胺基进攻溴代苯甲基酮合成路线 |
| 2.2 胺基进攻卤代苯乙醇合成路线 |
| 2.3 利用环氧开环合成路线 |
| 2.4 苯乙酮醛与胺缩合形成亚胺的合成路线 |
| 2.5 亨利反应的合成路线 |
| 3 结论与展望 |
四、(R)-沙丁胺醇的合成研究进展（论文参考文献）
- [1]表面等离子体共振直接法快速检测牛尿中克伦特罗和沙丁胺醇[D]. 孙铭雪. 烟台大学, 2021(11)
- [2]左旋R-沙丁胺醇凝胶剂的制备与银屑病治疗效果的验证[D]. 王昱堃. 广东工业大学, 2021
- [3]β2-AR/ERK1/2通路调控胃癌细胞EMT和迁移、侵袭作用的研究[D]. 张影. 承德医学院, 2021(01)
- [4](R)-左旋沙丁胺醇经鼻给药在大鼠帕金森疾病模型的治疗作用[D]. 张睿. 广东工业大学, 2020(03)
- [5]沙丁胺醇上转换标记磁分离荧光免疫检测方法研究[D]. 刘越. 天津科技大学, 2020(08)
- [6]左旋R-沙丁胺醇用于治疗咪喹莫特诱发的小鼠银屑病病变及其作用机制和代谢组学研究[D]. 刘菲. 广东工业大学, 2020(02)
- [7]基于DNA信号放大技术超灵敏检测水中沙丁胺醇[D]. 赵领娣. 河北科技大学, 2019(07)
- [8]左旋沙丁胺醇的合成工艺改进及有关物质研究[J]. 陈飞亚,胥翠,魏天航,许佑君. 中南药学, 2017(10)
- [9]基于沙丁胺醇抗体的β激动剂广谱免疫分析及3D-QSAR研究[D]. 姜文梦. 华南农业大学, 2017(08)
- [10]苯乙醇胺类药物合成方法的研究进展[J]. 王彤彤,王敏,宋印清,汤晓艳,周剑,杨梦瑞,毛雪飞. 化学试剂, 2016(09)